Komplement fixeringsreaktion (CBC)

Komplementfixeringsreaktionen (PCR) placeras i två faser: i den första fasen kombineras antigenet med testserumet, där antikroppar antas och komplement tillsätts, inkuberas i en termostat i 30 minuter.

Andra fasen: tillsätt det hemolytiska systemet (fårerytrocyter + hemolytiskt serum). Efter inkubering i en termostat i 30 minuter, ta hänsyn till resultatet.

Med en positiv CSC bildar serumantikroppar, när de kombineras med antigenet, ett immunkomplex som fäster komplement till sig själv och hemolys kommer inte att inträffa. Om reaktionen är negativ (det finns inga antikroppar i testserumet) förblir komplementet fritt och hemolys kommer att inträffa.

RSK används för serologisk diagnos av syfilis, gonorré, tyfus och andra sjukdomar.

Immunitetsreaktioner med märkta antigener och antikroppar baseras på det faktum att en av ingredienserna som är involverade i reaktionen (antigener eller antikroppar) kombineras med en märkning som lätt kan detekteras. Fluorokromer (RIF), enzymer (ELISA), radioisotoper (RIA), elektrontäta föreningar (IEM) används som märkning..

Den enzymbundna immunosorbentanalysen (ELISA), som andra immunreaktioner, används: 1) för att bestämma ett okänt antigen med användning av kända antikroppar eller 2) för att detektera antikroppar i serum med användning av ett känt antigen. Reaktionens särdrag är att en känd ingrediens i reaktionen kombineras med ett enzym (till exempel peroxidas). Närvaron av enzymet bestäms med hjälp av ett substrat som färgas av enzymets verkan. Den mest använda fasta fasen ELISA.

1) Antigendetektion. Det första steget är adsorptionen av specifika antikroppar på den fasta fasen, vilka är polystyren- eller polyvinylkloridytor i brunnarna i plastpaneler. Det andra steget är tillsatsen av ett testmaterial i vilket närvaron av ett antigen antas. Antigen binder till antikroppar. Därefter tvättas brunnarna. Det tredje steget är tillsatsen av ett specifikt serum innehållande antikroppar mot detta antigen, märkt med ett enzym. Märkta antikroppar binder till antigener och överskott av antikroppar avlägsnas genom tvättning. Således, om det finns antigener i testmaterialet, bildas en antikropp-antigen-antikroppar märkta med ett enzymkomplex på ytan av den fasta fasen. Ett substrat tillsätts för att detektera enzymet. För peroxidas är substratet ortofenylendiamin blandat med H2HANDLA OM2 i en buffertlösning. Under enzymets verkan bildas produkter som har en brun färg.

2) Detektion av antikroppar. Det första steget är adsorptionen av specifika antigener på brunnarnas väggar. I kommersiella testsystem adsorberas antigener vanligtvis redan på ytan av brunnarna. Det andra steget är tillsatsen av testserumet. I närvaro av antikroppar bildas ett antigen-antikroppskomplex. Det tredje steget - efter tvättning läggs antiglobulinantikroppar (antikroppar mot humana globuliner) märkta med ett enzym till brunnarna. Reaktionsresultaten utvärderas enligt ovan..

Prover som är kända för att vara positiva och kända för att vara negativa, som finns i kommersiella system, används som kontroller..

ELISA används för att diagnostisera många infektionssjukdomar, särskilt HIV-infektion, viral hepatit.

Immunoblotting är en typ av ELISA (en kombination av elektrofores och ELISA). Biopolymerer, till exempel antigener av humant immunbristvirus, separeras med gelelektrofores. Sedan överförs de separerade molekylerna till nitrocellulosaytan i samma ordning som de var i gelén. Överföringsprocessen kallas blotting, och det resulterande trycket kallas blot (blot). Detta avtryck påverkas av testserumet. Tillsätt sedan serum mot humana globuliner, märkta med peroxidas, sedan blir substratet, som under enzymets verkan blir brunt. Bruna ränder bildas där antikropparna har bundits till antigenerna. Metoden låter dig upptäcka antikroppar mot individuella antigener av viruset.

Radioimmunanalys (RIA). Metoden låter dig bestämma mängden antigen i testprovet. Först fästs ett material som misstänks innehålla ett antigen till immunserumet, sedan ett känt antigen märkt med en radioisotop, till exempel I 125. Som ett resultat binder ett detekterbart (omärkt) och känt märkt antigen till ett begränsat antal antikroppar. Eftersom det märkta antigenet tillsätts i en viss dos är det möjligt att bestämma hur mycket av det som binder till antikroppar och vilken del som förblev fri på grund av konkurrens med det omärkta antigenet och avlägsnades. Mängden märkt antigen bundet till antikroppar bestäms med användning av en räknare. Det är omvänt proportionellt mot mängden detekterat antigen.

Immunoelektronmikroskopi (IEM). Ett specifikt antiserum märkt med en elektrontät substans är fäst till ett antigen, till exempel till influensaviruset. Metalliska proteiner (ferritin, hemocyanin) eller kolloidalt guld används som märkning. Med mikroskopi i ett elektronmikroskop tas fotografier där influensavirus är synliga med mörka prickar fästa vid dem - molekyler av märkta antikroppar.

Kontrollfrågor

Förvärvad immunitet, dess skillnad från ärftlig (specifik, medfödd). Typer av förvärvad immunitet.

En uppgift. I familjen blev barnet Valery, tre år gammal, sjuk med difteri. Andra familjemedlemmar blev inte sjuka och mamman hade haft difteri i barndomen och fadern vaccinerades med difteritoxoid. Äldre syster Natasha, fem år gammal, vaccinerades inte med difteritoxoid på en gång på grund av medicinska kontraindikationer, så hon var tvungen att genomgå akut profylax med hjälp av antidifter antitoxiskt serum. Den yngre bror, Vitaly, tre månader gammal, blev inte sjuk, även om han inte vaccinerades med någonting. Det finns en katt och en hund i huset, de är inte sjuka. Namnge för var och en av familjemedlemmarna och för djuren vilken typ av immunitet som de inte blev sjuka för.

Vad är ett antigen? Vilka ämnen kan vara antigener? Kompletta antigener och haptens, hur skiljer de sig från varandra? Antigen struktur. Vad heter den del av antigenmolekylen som bestämmer dess specificitet? Namnge antigener som du känner till. Vad är autoantigener? Antigen struktur av en mikrobiell cell. Flagellat och somatiska antigener; lokalisering, bokstavsbeteckning, kemisk natur, förhållande till temperatur, produktionsmetod, praktisk tillämpning. Toxoid, dess egenskaper, applikation, produktion. Vilken vävnad utgör kroppens immunförsvar? Ange de centrala och perifera organen i det mänskliga immunsystemet. Beskriv bildandet av ett humoralt och cellulärt immunsvar. Ange cellerna som fångar upp och smälter antigen; celler som interagerar i bildandet av humoristisk immunitet, cellulär immunitet; celler som transformeras och omvandlas till plasmaceller som producerar antikroppar; celler som stimulerar denna process; celler som undertrycker immunsvaret; celler som dödar tumörceller och celler infekterade med ett virus. Vad är antikroppar? Hur får man immunserum? Hur får man ett serum som neutraliserar tetanustoxin? Vilka antigener bildas antitoxiner, agglutininer, hemolysiner mot? Vilka antikroppar bildas när difteritoxoid införs i kroppen? difteribakterier? Antikropparnas kemiska natur och struktur. Vad är en immunglobulinaktiv plats? Lista klasserna av immunglobuliner, deras egenskaper. Ange klassen immunglobuliner som kan passera moderkakan. Vilken klass är sekretoriska immunglobuliner? Antikroppsakkumuleringsdynamik. Hur skiljer sig det sekundära immunsvaret från det primära? Hur används kunskap om dynamiken i immunsvaret i praktisk medicin? Vad är immunitetsreaktioner, vad är deras mekanism, reaktionsfaser. I vilka två riktningar används immunreaktionerna? Lista immunitetsreaktionerna.

En uppgift. Ersätt de saknade orden "toxoid" eller "antitoxin": _________ är ett antigen, _________ är en antikropp, __________ skapar aktiv immunitet när den införs i kroppen, __________ skapar passiv immunitet när den införs i kroppen, __________ erhålls genom immunisering av djur, ___________ erhålls från ett toxin vid exponering formalin och värme, ___________ neutraliserar toxiner, __________ orsakar bildandet av antikroppar i kroppen.

Agglutinationsreaktion: vad är agglutination, vad är ett antigen, vad är en antikropp; metoder för inställning, vilka kontroller som ställs in och varför; hur kontrollerna ska se ut. Agglutinerande sera, vad de innehåller, hur de erhålls, vad de används för; vad är serumagglutinerande titer? Indirekt (passiv) hemagglutinationsreaktion: vad fungerar som ett antigen i denna reaktion, hur den erhålls, reaktionsmekanismen. Vad är erytrocytdiagnostikum? Vad är en antikropps erytrocyt diagnosticum? Nederbördsreaktioner: vad är nederbörd, vad är antigenet; hur får man utfallande serum? Vad är en utfallande serumtiter? Inställningsmetoder, praktisk tillämpning.

Komplementfixeringsreaktion (CBC): CBC-princip; vad bildas när immunserumet interagerar med ett specifikt antigen; vad händer med komplementet om det finns under denna interaktion? Vad är komplementets öde om det inte finns någon specifik affinitet mellan antigen och antikroppar? Om slutresultatet av CSC är hemolys, vad betyder det - positivt eller negativt? Metod för att ställa in RSK. Varför ska testserumet inaktiveras? Hemolytiskt serum: vad innehåller det, hur erhålls det, vad är titern och hur bestäms det? Komplement: kemisk natur, förhållande till hög temperatur, var finns det? Hur kan komplement förstöras? Som praktiskt taget används som ett komplement?

En uppgift. En blodfläck hittades på kläderna hos mannen som anklagades för mordet. Vilken reaktion kan användas för att avgöra om det är humant blod; vad blir antigenet i denna reaktion, och vad kommer att vara antikroppar; vilket diagnostiskt medel som ska finnas tillgängligt i laboratoriet för denna reaktion, hur bereds det??

En uppgift. Hur man använder en utfällningsreaktion för att avgöra om ett prov av nötkött eller hästkött som levereras för analys är; vilka diagnostiska läkemedel som behövs?

Agargelutfällningsreaktion, härdningsmetoder, praktisk användning.

Serologiska studier: vad är det, diagnostiska metoder, leveransprocessen, tolkning av resultaten

Var och en av oss stod inför en gång minst en gång inför smittsamma sjukdomar. Alla orsakas av ett stort antal patogena medel: bakterier, virus, protozoer och svampar. Mikrobiologi har miljontals mikroorganismer som kan leda till utveckling av infektion hos människor.

Vissa av dem är villkorligt patogena, andra är obligatoriska patogener. Inom medicin finns det ett stort antal laboratoriemetoder för att identifiera en patogen. Var och en av dem har sina egna nackdelar och fördelar. Metodens känslighet och noggrannhet är av stor betydelse..

De vanligaste metoderna är genetiska molekylära och serologiska studier. När man får en remiss för molekylära och serologiska studier, tänker patienter på vad det är och tror att detta är en mycket svår undersökning. Faktum är att processen för att klara analysen inte överstiger 5 minuter, och informationsinnehållet varierar från 95-100%.

  1. Vad är serologisk analys
  2. Fördelar och nackdelar
  3. I vilka fall ordineras
  4. Diagnostiska metoder
  5. Immunfluorescerande reaktion RIF
  6. Indirekt hemagglutinationsreaktion av RNGA
  7. ELISA-enzymimmunanalys
  8. Hur man förbereder sig för leverans
  9. Analysprocess
  10. Avkodning av resultaten
  11. Vad ska man göra om en sexuellt överförbar sjukdom upptäcks

Vad är serologisk analys

Serologiska tester är ett viktigt verktyg för att identifiera orsaken till en infektionssjukdom. Serodiagnostics är ett specifikt blodprov som bygger på interaktionen mellan antigener och antikroppar i serum.

Antikroppar är proteinmolekyler som bildas i människokroppen några dagar efter exponering för en patogen. De är strikt specifika för varje infektion och är utvecklade för att förstöra patogenen. Erkännande av dessa proteinfraktioner gör det möjligt att snabbt identifiera den mikroorganism som de bildades till. Antigener är å andra sidan främmande proteiner som finns i bakterier. Den syntetiserade antikroppen hittar ett antigen i blodet och binder fast till det, vilket förhindrar att det påverkar kroppen negativt.

Bindningsreaktionen för dessa två proteiner för att bilda ett enda komplex ligger till grund för användningen av alla serologiska reaktioner. För att söka efter antikroppar används speciella standardlösningar med patogenantigener (diagnostikum) som läggs till det analyserade blodet. Serodiagnostics bestämmer alla proteinmarkörer för infektioner, och den efterföljande avkodningen av resultaten ger också information om sjukdomens varaktighet. Denna funktion är endast karakteristisk för serologisk analys, vilket gör den till valfri metod i många kliniska situationer..

Fördelar och nackdelar

Den serologiska metoden för laboratoriediagnostik har ett stort antal fördelar, som djupt introducerade den i praktisk användning inom alla läkemedelsgrenar: gynekologi, urologi, infektionssjukdomar och venereologi.

Serodiagnosis är ett offentligt tillgängligt test som ger snabba, exakta resultat. Det kräver inte långvarig förberedelse för materialinsamling och tolereras lätt av alla patienter. För att hämta venöst blod från en patient är det nödvändigt att följa en diet i endast 48 timmar. Serologiska tester har också hög specificitet (100%), känslighet (95%) och noggrannhet (90-95%).

Men den här analysen av venöst blod kräver mycket dyr diagnostik, vilket också påverkar dess kostnad. Vissa patogener är svagt immunogena, det vill säga kroppen producerar få antikroppar mot dem, så serodiagnostiker är omöjliga. Dessutom används metoden mycket mindre ofta för virusinfektiösa patologier, eftersom den är sämre än PCR-analys..

I vilka fall ordineras

Serologiska blodprover föreskrivs för diagnos av infektionssjukdomar: bakterie-, viral-, protozo-, parasit- och blandade infektioner. Antikroppsdetektering används mest i obstetrisk-gynekologisk och urologisk praxis. I urologi används denna laboratoriestudie för uretrit med oklar etiologi, balanit och balanopostit. I gynekologi skickas de för undersökning för eventuell inflammatorisk process i reproduktionssystemet (vulvovaginit, kolpit, cervicit och endometrit).

I obstetrik ordineras varje gravid kvinna ett venöst blodprov för att utesluta farliga sjukdomar. Dessa infektioner kallas "TORCH-komplex" och bestäms med hjälp av serologiska tester. TORCH-infektioner orsakar missbildningar hos fostret som utvecklas, vilket ofta är oförenligt med livet. Det är därför tidig och korrekt diagnos av dessa infektioner är det främsta målet för obstetrikern-gynekologen. Serologi utförs även om det finns en misstanke om manlig eller kvinnlig infertilitet på grund av infektiös patologi.

Om läkaren misstänker att patienten har en sexuellt överförbar infektion, krävs en omfattande undersökning, inklusive serodiagnostiker. Om en av partnerna har en sjukdom från STI-gruppen, måste den andra partnern testas, även om han inte har några kliniska symtom.

Diagnostiska metoder

Serologiska tester inkluderar flera typer. Alla är baserade på sökandet efter antikroppar (immunglobuliner) och antigener, men de utförs på olika sätt och har olika diagnostiska kriterier för att ställa en diagnos. Serologiska metoder för laboratorieforskning, beroende på metod, är indelade i enkla och komplexa. Klassificeringen baseras på hur många proteiner som behöver hittas: enkla reaktioner bestäms endast av antikroppar eller antigener, och komplexa sådana - komplex "antigen + immunglobulin". En mer komplex komplex forskningsmetod är att föredra, eftersom analysens känslighet är mycket högre.

Oftast i laboratorier representeras serologisk diagnostik av följande immunokemiska sereaktioner:

  • immunfluorescensreaktion (RIF);
  • enzymimmunanalys (ELISA);
  • indirekt hemagglutinationsreaktion (RNGA);
  • komplement fixeringsreaktion (CBC).

Dessa typer av forskning är komplexa seroreaktioner och har betydande fördelar jämfört med resten. De utförs extremt snabbt, har hög noggrannhet vid diagnos av sjukdomar och kräver inte långvarig förberedelse: patienten är endast skyldig att klara ett venöst blodprov.

Immunfluorescerande reaktion RIF

Immunfluorescensreaktion (RIF), eller Koons-analys, är en metod för snabb detektion av antigener av ett patogent medel i en patients biomaterial. För RIF används ett speciellt färgämne - fluorokrom, som kan lysa under ett självlysande mikrobiologiskt mikroskop. Fluorokrom tillsätts till det diagnostiska serumet med strikt överensstämmelse med koncentrationen, annars kan reaktionen visa falska resultat. Den immunfluorescerande reaktionen är av två typer: direkt och indirekt.

Den direkta Koons-reaktionen avslöjar endast patogenens antigener. För att bestämma dem tillsätts ett diagnostiskt serum till biomaterialet, bestående av antikroppar och fluorokrom. Antigener på patogenens cellvägg binder till färgade antikroppar. En laboratoriereaktionsläkare undersöker en glasskiva under ett mikroskop och ser en ljusgrön glöd. Ett typiskt exempel på en sådan reaktion är identifieringen av klamydia kontrasterad med Evans blue.

Indirekt RIF (RNIF) bestämmer antigen-antikroppskomplex. För att göra detta lägger läkaren sekventiellt omärkta immunglobuliner till provet så att de binder till antigener. Sedan tillsätts ett nytt serum till de bildade immunkomplexen, innehållande antikroppar som redan är märkta med ett färgämne till de nybildade komplexen. Den vanligaste direktreaktionen används för att diagnostisera virussjukdomar..

Den enda nackdelen med dessa reaktioner är en viss subjektivitet när man tar hänsyn till resultaten: samma glödintensitet betraktas ibland av läkare annorlunda, vilket i slutändan leder till falska laboratorieundersökningsdata..

Indirekt hemagglutinationsreaktion av RNGA

RNGA är en analys som syftar till att detektera immunglobuliner eller antigener i olika biologiska vätskor. Reaktionen av indirekt hemagglutination är en av de mest exakta metoderna för att bestämma immunoglobulins titer, vilket gör det möjligt att bedöma stadiet i den infektiösa processen. En ökning av immunoglobulins titer med fyra gånger i två blodprover som tagits med ett intervall på flera veckor indikerar en akut infektiös process av bakteriell eller viral etiologi. RNGA gör det möjligt för den behandlande läkaren att ordinera rätt läkemedelsbehandling med hänsyn till sjukdomsstadiet. Studien användes allmänt för att detektera STI, meningokockinfektion, botulinumtoxin (botulinumtoxin) och de flesta virusinfektioner.

För studien används röda blodkroppar - erytrocyter, på vars yta antigener eller antikroppar finns. Serum kallas antigen eller antikropps-erytrocyt diagnosticum. Diagnosticum tillsätts till testblodet, därefter övervakas reaktionen. När dessa erytrocyter fäster vid antigener eller blodimmunglobuliner bildas komplex och röda blodkroppar börjar fällas ut. När de testas negativa ackumuleras röda blodkroppar som en liten, knappformad fläck. Om det på botten av provröret eller tabletten har bildats en fällning med kammade kanter i form av ett paraply, anses reaktionen vara positiv.

Svårigheten att genomföra detta serologiska test ligger i behovet av noggrann beredning av erytrocytdiagnostik och strikt efterlevnad av koncentrationerna av de använda komponenterna..

ELISA-enzymimmunanalys

Den enzymbundna immunosorbentanalysen anses vara den mest exakta, specifika och känsliga seroreaktionen. ELISA-resultatredovisning är automatiserad och den mänskliga faktorn och subjektiva utvärderingen av data undantas. Noggrannheten i resultatet når 98%, och vid upprepad undersökning - 100%. ELISA används för att diagnostisera sexuellt överförbara infektioner, HIV, viral hepatit A, B, C, D, E, TORCH-infektioner och många andra sjukdomar.

Det finns mer än tio modifieringar av denna analys (direkt, indirekt, icke-konkurrenskraftig, fast fas etc.), men alla har speciella, karakteristiska diagnostiska egenskaper, men en liknande uppförandeprincip. Faserna av immunologiska serologiska reaktioner inkluderar skapandet av ett antigen-antikroppskomplex, till vilket enzymer tillsätts som spelar rollen som en märkning. Därefter placeras testmaterialet på en speciell platta, placeras i ett automatiserat system och en sökning efter komplex märkta med radionuklider påbörjas. Analysatorn detekterar ljusmärken, mäter den optiska densiteten och graden av luminiscens hos immunceller och ger sedan analysresultatet.

Hur man förbereder sig för leverans

Analysen kräver ingen speciell förberedelse, alla regler motsvarar den vanliga donationen av venöst blod.

Patienten måste strikt följa ett antal enkla regler:

  • 72 timmar före manipuleringen bör du följa en diet: du kan inte äta fet, stekt, salt och kryddig mat, alkoholhaltiga drycker är också förbjudna;
  • det rekommenderas att bibehålla en optimal vattenbalans i kroppen, och för detta måste du dricka minst två liter rent dricksvatten;
  • analysen av venöst blod utförs på fastande mage, därför kan du inte äta, dricka te, kaffe och andra drycker minst 10 timmar före manipuleringen;
  • Ingen rökning 4 timmar före ingreppet.

Om patienten av hälsoskäl är skyldig att ta några piller är det nödvändigt att informera den behandlande läkaren om detta i förväg. En timme före leveransen av materialet rekommenderas att du undviker fysisk aktivitet, och innan du går in i behandlingsrummet ska du sitta ner och vila i 10-15 minuter.

Analysprocess

Provtagning av venöst blod för serologisk undersökning utförs på morgonen. Patienten ska anlända till laboratoriet i förväg och ta med sig nödvändiga dokument (pass och remiss för analys).

Patienten erbjuds att gå till behandlingsrummet och sitta bekvämt på stolen. Blod tas från en ven i armbågsböjningen, därför är det nödvändigt att frigöra underarmen och armbågsområdet från saker. En turné appliceras på axeln och en kudde placeras under armen. Sjuksköterskan tar på sig sterila engångshandskar och behandlar punkteringsstället med en bomullspinne doppad i desinfektionsmedel.

Algoritmen för att utföra en venös injektion inkluderar pumpning av blod i en ven, för detta uppmanas patienten att knyta ihop och rensa näven flera gånger. I detta fall visualiseras och palperas fartyget bättre, vilket underlättar insamlingen av material. Sjuksköterskan sätter sedan in sprutans nål i en ven, drar 10 ml blod och applicerar en bakteriedödande plåster på injektionsstället. För att undvika bildandet av ett hematom, efter manipulation, ska armen böjas vid armbågen i 15-20 minuter.

Avkodning av resultaten

För en korrekt diagnos måste serologiska reaktioner dechiffreras av en kvalificerad specialist. Detekteringen av antikroppar indikerar ännu inte förekomsten av sjukdomen; i vissa fall är cirkulationen av immunglobuliner i blodet normen. Så i vår kropp är IgM-antikroppar mot mässling, vattkoppor etc. ständigt närvarande. De är en markör för den tidigare infektionen och skyddar oss från återinfektion. Därför bör registreringen av resultaten av blodprovet och avkodningen av den serologiska studien utföras individuellt för varje patient..

Det finns dock vissa serologiska markörer för infektionssjukdomar:

  • Detektion av immunoglobuliner klass A i blodet mot ett virus eller bakterier indikerar en akut infektiös process som varar högst 14 dagar.
  • Om immunglobuliner i klass M finns i blodet krävs utökad laboratoriediagnostik, eftersom dessa antikroppar är en markör för både en tidigare sjukdom och långvarig infektion.
  • En ökning av antikroppstiter med fyra eller fler gånger i två på varandra följande blodprover indikerar förekomsten av en infektiös sjukdom.
  • Detektion av eventuella patogenantigener indikerar att patogenen finns i kroppen.

Vid en oklar diagnostisk bild utförs upprepade serologiska tester eller undersökningen kompletteras med andra forskningsmetoder (PCR, bakteriekultur etc.)

Vad ska man göra om en sexuellt överförbar sjukdom upptäcks

Om serologisk diagnostik har bekräftat förekomsten av STI, är det nödvändigt att omedelbart gå vidare till behandlingsstadiet för att undvika komplikationer och kroniskhet i processen. Patienten ska registrera sig om för ett samråd med den behandlande läkaren. Han kommer att ordinera etiotropisk komplex behandling och kommer dynamiskt att övervaka patientens tillstånd under läkemedelsbehandling..

Titel: Serologisk forskning: vad är det, ett blodprov för att bestämma infektioner, hur man donerar och dechiffrerar, reaktionsmetoder för att bestämma sjukdomar

Beskrivning: Vad är serologiska tester och för att identifiera vilka sjukdomar de används. Hur är blodprovet för att bestämma infektionen. Hur man förbereder, skickar och dechiffrerar resultatet efter mottagandet. Tekniker för att genomföra reaktioner för att bestämma sjukdomen.

Syfilisblodprov (RW)
(Wasserman-reaktion)

Blodprov

  • allmän beskrivning
  • Standarder
  • Sjukdomar

allmän beskrivning

Wassermann-reaktionen (RW) är den mest populära immunologiska reaktionen som används för att diagnostisera syfilis sedan upptäckten 1906. RW tillhör gruppen komplementbindningsreaktioner (CSC) och baseras på förmågan hos blodserumet hos en patient med syfilis att bilda ett komplex med motsvarande antigener. Moderna CSC-metoder som används för att diagnostisera syfilis skiljer sig avsevärt i sina antigener från den klassiska Wasserman-reaktionen, men termen "Wasserman-reaktion" behålls traditionellt av dem.

I blodet från en infekterad person visas antikroppar som produceras av immunsystemet. Det orsakande medlet för sjukdomen, treponema pallidum, innehåller kardiolipinantigenet, vilket orsakar produktion av antikroppar bestämda av RW. En positiv Wasserman-reaktion indikerar bara förekomsten av sådana antikroppar i humant blod, och på grundval av detta dras en slutsats om förekomsten av en sjukdom.

Hemolysreaktionen är en indikator på forskningsresultatet i RSC. Två komponenter är inblandade i reaktionen: fårerytrocyter och hemolytiskt serum. Hemolytiskt serum erhålls genom immunisering av en kanin med erytrocyter från får. Den inaktiveras inom 30 minuter vid en temperatur av 56 ° C. Resultaten av RSC utvärderas beroende på närvaron eller frånvaron av hemolys i provrören. Närvaron av hemolys förklaras av det faktum att om det inte finns några syfilitiska antikroppar i det testade serumet, inträffar inte antigen-antikroppsreaktionen, och hela komplementet går till reaktionen av lamm-erytrocyter-hemolysin. Och om det finns specifika antikroppar går komplementet helt till antigen-antikroppsreaktionen och hemolys sker inte.

Alla ingredienser för Wasserman-reaktionen tas i samma volym - 0,5 eller 0,25 ml. För att fixera komplementet ordentligt på ett specifikt komplex placeras en blandning av det studerade serumet, antigenet och komplementet i en termostat vid 37 ° i 45-60 minuter. (I-reaktionsfas), varefter ett hemolytiskt system införs, bestående av lamm-erytrocyter och hemolytiskt serum (reaktionens II-fas). Därefter placeras rören igen i en termostat i 30-60 minuter innan hemolysen börjar i kontrollen, i vilken antigenet ersätts med saltlösning, och saltlösning införs istället för testserumet. Antigener för Wasserman-reaktionen släpps färdiga med en indikation på titern och utspädningsmetoden.

Den maximala positiviteten för Wasserman-reaktionen betecknas vanligtvis med antalet korsningar: ++++ (kraftigt positiv reaktion) - indikerar en fullständig fördröjning av hemolys; +++ (positiv reaktion) - motsvarar en signifikant fördröjning i hemolys, ++ (svagt positiv reaktion) - bevis på en partiell fördröjning i hemolys, + (tveksam reaktion) - motsvarar en liten fördröjning i hemolys. Negativ RW kännetecknas av fullständig hemolys i alla provrör.

Ibland är dock falska positiva resultat också möjliga - detta beror på det faktum att kardiolipin finns i en viss mängd i cellerna i människokroppen. Det mänskliga immunsystemet skapar inte antikroppar mot "eget" kardiolipin, men det finns undantag från denna regel, på grund av vilken en positiv Wasserman-reaktion inträffar hos en helt frisk person. Detta observeras speciellt efter svåra virussjukdomar och andra sjukdomar - lunginflammation, malaria, lever- och blodsjukdomar, under graviditet, dvs. vid stunder av allvarlig försvagning av immuniteten.

Om läkaren misstänker att patienten har ett falskt positivt resultat för Wasserman-reaktionen, kan han ordinera honom ett antal ytterligare studier, som vanligtvis används vid diagnos av sexuellt överförbara sjukdomar..

Sjukdomar och fall där läkaren kan ordinera ett blodprov för RW

  • Syfilis.
  • Misstänkt syfilis hos personer i kontakt med syfilispatienter.
  • Graviditet.
  • Drogmissbruk.
  • Abort.
  • Feber åtföljd av en ökning av regionala lymfkörtlar.
  • Inledande besök på kliniken.
  • Sjukhusinläggning för behandling.
  • Behandling på ett psykiatriskt eller neurologiskt sjukhus.
  • Donation av blod, vävnader, spermier och andra kroppshemligheter.
  • Arbetar inom tjänstesektorn, handel, medicinsk vård, sociala och utbildningsområden.

Genomföra proceduren för att klara ett blodprov för RW

Blod på RW doneras endast på fastande mage. Den sista måltiden bör vara senast 6 timmar före testet. Sjukvårdspersonalen sätter patienten eller lägger honom i en soffa och drar 8-10 ml blod från ulnarvenen.

Om analysen är nödvändig för ett spädbarn, utförs staketet från kranial- eller halsvenen.

Beredning med leverans av blodprov för RW

I 1-2 dagar före testet bör du sluta dricka alkohol. Det rekommenderas inte heller att äta fet mat - de kan snedvrida resultatet. Som förberedelse för analysen bör du avstå från att ta digitalis-läkemedel.

Kontraindikationer

Analysresultatet blir falskt om:

  • patienten har en ökad kroppstemperatur,
  • en person är sjuk med en smittsam sjukdom eller har precis haft den,
  • en kvinna har en menstruationsperiod,
  • gravid under de sista veckorna före förlossningen,
  • de första tio dagarna efter förlossningen,
  • de första tio dagarna av ett barns liv.

Tolkning av analysresultat

Vid primär syfilis blir Wasserman-reaktionen positiv 6-8 veckor efter sjukdomsförloppet (i 90% av fallen), medan följande dynamik noteras:

  • under de första 15-17 dagarna efter infektion är reaktionen hos de flesta patienter vanligtvis negativ.
  • vid 5-6: e veckan av sjukdomen, hos cirka 1/4 av patienterna, blir reaktionen positiv;
  • vid 7-8 veckors sjukdom blir RW ​​positivt i de flesta fall.

I sekundär syfilis är RW alltid positiv. Tillsammans med andra serologiska reaktioner (RPHA, ELISA, RIF) tillåter det inte bara att identifiera förekomsten av patogenen utan också att ta reda på ungefärlig tid för infektion.

Med utvecklingen av syfilitisk infektion under den fjärde veckan av sjukdomen, efter starten av primärt syfilom, går Wasserman-reaktionen från negativ till positiv och förblir så i den sekundära färska och i den sekundära återkommande perioden av syfilis. Under den latenta sekundära perioden och utan behandling kan RW bli negativ så att det med början av klinisk återkommande syfilis blir positivt igen. Därför, under den latenta perioden av syfilis, indikerar en negativ Wasserman-reaktion inte frånvaro eller botning, utan fungerar bara som ett gynnsamt prognostiskt symptom.

Med aktiva lesioner av tertiär period av syfilis, uppträder en positiv RW i ungefär 3/4 av fallen. När de aktiva manifestationerna av syfilisens tertiära period försvinner blir det ofta negativt. I det här fallet indikerar inte en negativ Wasserman-reaktion hos patienter att de inte har syfilitisk infektion..

I tidig medfödd syfilis är RW positiv i nästan alla fall och är en värdefull metod för att verifiera sjukdomen. Med sen medfödd syfilis motsvarar dess resultat de som erhållits under den tertiära perioden av förvärvad syfilis.

Studien av Wasserman-reaktionen i blodet hos syfilispatienter som genomgår behandling är av stor praktisk betydelse. Trots kraftig anti-syfilitisk behandling blir Wasserman-reaktionen hos vissa patienter inte negativ - detta är den så kallade seroresistenta syfilis. I det här fallet är det ingen mening att utföra oändligt anti-syfilitisk terapi för att uppnå övergången av positiv RW till negativ..

Av ovanstående följer att en negativ Wasserman-reaktion inte alltid är ett tecken på frånvaron av syfilitisk infektion i kroppen..

En positiv Wasserman-reaktion är möjlig hos personer med ett antal andra sjukdomar och tillstånd som inte är relaterade till syfilis: tuberkulos, systemisk lupus erythematosus, blodsjukdomar (leukemier), spetälska, pemphigus, leptospiros, maligna tumörer, tyfus, scharlakansfeber, beriberisjukdom, sömnsjukdom, under graviditet, före eller efter förlossning, menstruation, efter anestesi, efter att ha druckit alkohol, i drogmissbrukare, tar fet mat, mediciner, införandet av främmande sera. I sådana fall används andra metoder för att klargöra diagnosen (RPGA, ELISA, RIF). Den ospecifika positiva Wasserman-reaktionen i malaria är mycket karakteristisk, särskilt under attackperioden. Om RW är positivt hos en person utan kliniska manifestationer av syfilis och förnekar syfilitisk infektion, bör malaria övervägas..

Allt ovanstående indikerar att ett positivt resultat av Wasserman-reaktionen ännu inte är ett definitivt bevis på närvaron av en syfilitisk infektion..

Återhämtning efter testet

Efter att ha tagit ett blodprov rekommenderar läkare en korrekt och balanserad diet, så mycket som möjligt vätska. Du har råd med varmt te och choklad. Det kommer att vara användbart att avstå från fysisk aktivitet och under inga omständigheter dricka alkohol.

Standarder

Normalt bör hemolys observeras i blodet - detta anses vara en negativ reaktion på syfilis (Wasserman-reaktionen är negativ). Om det inte sker någon hemolys bedöms reaktionsgraden, vilket beror på sjukdomsstadiet (markerat med "+" -tecken). Det bör vara känt att 3-5% av helt friska människor kan ha en falsk-positiv reaktion. Samtidigt kan reaktionen hos sjuka personer vara falskt negativa under de första 15-17 dagarna efter infektionen..

Sjukdomar för vilka en läkare kan beställa ett blodprov för syfilis (RW)

  1. 1. Syfilis

  • Facebook
  • Twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • Youtube
  • post

  • Online diagnos
    © LLC "Intelligent Medical Systems", 2012—2020.
    Alla rättigheter förbehållna. Webbplatsinformation är lagligt skyddad, kopiering är straffbart enligt lag.

    Annonsplacering, samarbete: [email protected]

    Webbplatsen är inte ansvarig för innehållet och noggrannheten i innehåll som publiceras av användare på webbplatsen, recensioner av webbplatsbesökare. Webbplatsmaterial är endast för informations- och informationsändamål. Webbplatsens innehåll ersätter inte professionell medicinsk rådgivning, diagnos och / eller behandling. Självmedicinering kan vara hälsofarligt!

    Serologiskt blodprov

    Vad är ett serologiskt blodprov?

    Serologiobjekt - antigener och antikroppar

    Serologisk testning (SI) baseras på antigenernas och antikropparnas förmåga att binda till varandra. SI låter dig exakt identifiera närvaron av ett specifikt virus eller bakterier, blodgrupp och rhesus, kroppens reaktivitet mot antibiotika, autoimmuna sjukdomar, hormonella störningar, proteins individuella specificitet, för att bestämma effektiviteten av behandlingen.

    Immunsystemet kämpar mot patogena mikrober (antigener) som kommer in i kroppen med hjälp av antikroppar, samtidigt som det skapar en egen typ av försvar mot vart och ett av virusen, parasiterna eller bakterierna.

    Immunsystemets förmåga att producera speciella ämnen som neutraliserar skadliga partiklar har varit kända för forskare under lång tid. Men det var möjligt att se antigen-antikroppsreaktionen under laboratorieförhållanden först i slutet av 1800-talet. Det visade sig att som ett resultat av bildandet av en bunt fälls komplexen ut och bildar flingor eller grumlighet. Sådana reaktioner kallas agglutination och nederbörd. Under 1900-talet utvecklades serologin, vetenskapen om serumets egenskaper, snabbt, nya diagnostiska metoder baserade på antigen-antikroppsreaktioner upptäcktes. Idag finns det många sätt att upptäcka immunkomplex, och SI är en oumbärlig länk i diagnostik, behandling och skapandet av nya läkemedel och vacciner..

    Indikationer för analys.

    Serologisk forskning används ofta i obstetrik

    Serologiska studier följer en modern person under hela sitt liv. De första testerna för att upptäcka vissa antikroppar utförs när barnet fortfarande är i livmodern. En gravid kvinna donerar blod för olika SI för att bestämma en möjlig Rh-konflikt eller infektioner som kan skada ett gravid foster. När ett barn föds förväntas serologiska tester för att diagnostisera medfödda sjukdomar. Därefter tas tester av följande skäl:

    • virus-, bakterie-, parasitinfektioner;
    • identifiering av aktivitet, utvecklingsstadium för sjukdomen;
    • hormonella patologier;
    • infertilitet;
    • autoimmuna sjukdomar;
    • metabolisk sjukdom;
    • allergier;
    • onkologiska sjukdomar;
    • graviditetsplanering, graviditetsperiod, patologi hos gravida kvinnor;
    • identifiering av reumatoid faktor;
    • bestämning av blodgrupp och Rh-faktor;
    • effektiviteten av terapi för olika sjukdomar;
    • vaccinationseffektivitet;
    • preoperativ och postoperativ period, om det är nödvändigt att bedöma nivån av vissa antikroppar;
    • studie av kroppens immunförsvar.

    Förberedelse för forskning.

    Det är tillrådligt att avbryta intag av läkemedel inför testet.

    Eftersom serologiska studier täcker ett brett spektrum av tester kan i varje specifikt fall vissa förberedelser krävas, men det finns allmänna regler för att klara ett serologiskt test:

    • Dagen före studien bör du begränsa kosten för fet och stekt, uteslut alkohol.
    • Den sista måltiden bör avslutas 10 - 12 timmar före analysen.
    • På dagen för blodgivning bör du inte dricka kaffe, te eller andra drycker. Du kan dricka små mängder rent vatten.
    • Läkemedel utesluts före analys. Om det är omöjligt att avbryta mottagningen måste du förse läkaren med en fullständig lista över läkemedel, inklusive vitaminer, p-piller..
    • Alla andra studier eller medicinska ingrepp utförs efter SI.
    • Det rekommenderas att sluta röka 12 timmar innan du tar ett blodprov.
    • Den föregående dagen bör fysisk och emotionell stress undvikas, och innan studien är det lämpligt att sitta i 15 minuter i fullständig vila.
    • SI ordineras på morgonen och ges på fastande mage.

    Serologiska testmetoder.

    En mängd olika metoder kan användas i serologi

    Alla metoder för bestämning av antigen-antikroppskomplex (Ag-Ab) baseras på användningen av ett känt Ag eller Ab i sökandet efter det okända. Om det är nödvändigt att detektera Ar krävs diagnostiskt immunsera med innehållet av specifikt Ab. Om syftet med SI är att detektera Ab används diagnostik - suspensioner som innehåller vissa Ag.

    Serologiska tester kan återspegla ett kvalitativt eller kvantitativt resultat. I en kvalitativ studie kan resultatet vara negativt eller positivt, det vill säga att det önskade elementet antingen finns eller inte. Den kvantitativa summan uttrycks som ett numeriskt värde eller med "+" -tecken (vanligtvis från ett till fyra).

    Indirekt hemagglutination är en av de diagnostiska metoderna

    Serologiska forskningsmetoder:

    • Agglutination. Bindningen av Ab med Ar följt av bildandet av flingor eller fällning. Direkta, indirekta, detaljerade, indikativa reaktioner används för att detektera antikroppar i serum.
    • Hemagglutination. Erytrocyter med Ag eller Ab adsorberat på används, som är limmade på motsvarande Ab och Ar. De bildade komplexen faller ut i form av ett kammat sediment.
    • Nederbörd. Bildning av Ag-Ab-komplexet med efterföljande utfällning i form av grumlighet, kallad fällning.
    • Koagglutination. Detektion av Ag med hjälp av Ab adsorberat på protein från stafylokockceller.
    • Hämning av hemagglutination. Antikropparna i immunserumet undertrycker virusantikroppar, som ett resultat förlorar virusen sin förmåga att vidhäfta erytrocyter.
    • Indirekt Coombs-reaktion. Ab till ytan Ag av erytrocyter bestäms.
    • Ring nederbörd. Det utförs på basis av immunserum med en skiktning av lösligt Ag.
    • Dubbel radiell immundiffusion. Reaktionen är baserad på diffusion av antiserum och Ag-komponenter i agar- eller agarosbrunnar.
    • Komplement bindande reaktion. Förbindelsen mellan Ag och Ab åtföljs av adsorptionen av komplement; fårerytrocyter och Ab till dem i sammansättningen av hemolytiskt serum används som en indikator.
    • Neutralisering. Baserat på neutralisering av virusmedlet med antikroppar.
    • Reaktioner baserade på märkning av Ab och Ar med en fluorescerande eller enzymkomposition - immunofluorescerande (RIF) och enzymbunden immunosorbent (ELISA) -metoder.

    Immunfluorescensmetod.

    "Glöd" i ett mörkt fältmikroskop

    Denna metod är baserad på användning av Ab märkt med ett fluorescerande ämne. Oftast används fluoresceinisotiocyanat som en etikett, som har en grön glöd i ultravioletta strålar. Analysresultatet bedöms utifrån graden av ljusstyrka. En manuell bestämningsmetod kan användas med hjälp av ett fluorescerande mikroskop, ett optiskt mikroskop med en självlysande infästning, samt en automatisk metod med en mikrochipcytometer, flödescytometer eller robotfluorescensmikroskop..

    RIF utförs med direkta och indirekta metoder. Den direkta metoden betyder direkt bindning av sorberad Ar till märkt Ab. Den indirekta metoden innebär användning av omärkt Ab för att binda till Ar, och sedan tillsats av märkt Ab, vilket undviker icke-specifika reaktioner.

    Länkad immunosorbentanalys.

    Immunoanalys som en metod för serologisk diagnos

    ELISA bygger på identifiering av Ag-Ab-komplex genom att märka en av komponenterna. Som en etikett används olika enzymer som bildar en färg som ett resultat av en enzymatisk reaktion. Det finns olika ELISA-metoder, de kan klassificeras som homogena och heterogena metoder..

    Homogen betyder att alla reaktionssteg sker i lösning.

    Heterogena metoder inkluderar fasseparation med användning av fasta medier.

    Homogena-heterogena metoder baseras på det faktum att Ar-Ab-komplex bildas i lösning, och sedan används den fasta fasen för separation..

    Det finns många variationer av ELISA-metoder, några presenteras nedan..

    1. Smörgåsmetod. En lösning med Ar tillsätts till det immobiliserade Ab, efter bildandet av komplex tvättas bäraren från överskott av komponenter och märkt Ab tillsätts. Som ett resultat är Ar fångade, immobiliserade och märkta med Ab, därav namnet på metoden..
    2. Ej konkurrenskraftig indirekt ELISA. Testserumet med Ab tillsätts till det immobiliserade Ag. När komplex bildas tvättas överskottet av Ab och markeras Ab, vilket kan binda till immunkomplexen fästa vid brunnarnas ytor..
    3. Konkurrenskraftig direkt ELISA. Testserumet och konjugatet innehållande märkt Ab sättes till det immobiliserade Ag. Flera typer av Ag-Am-komplex bildas: med märkt Ab och med omärkt Ab, som konkurrerar med varandra om anslutningen till Ar.

    Vilka infektioner ett serologiskt test hjälper till att identifiera.

    Serologisk diagnos gör att du kan identifiera patogenen

    Om patienten har vissa symtom eller andra studier indikerar en sjukdom förskrivs ett serologiskt test.

    Serologiska tester används för att diagnostisera följande infektioner:

    • hepatitvirus A, B, C, D, E;
    • syfilis;
    • HIV;
    • herpes;
    • cytomegalovirus;
    • röda hund
    • mässling;
    • påssjuka;
    • Epstein-Barr;
    • Helicobacter;
    • klamydia;
    • mycoplasma;
    • toxoplasma;
    • lamblia;
    • helminths;
    • ureaplasma;
    • parvovirus;
    • varicella-zoster-virus;
    • fästingburet encefalitvirus;
    • Dengue-virus;
    • kikhosta;
    • borrelia;
    • legionella.

    Fördelar med den serologiska forskningsmetoden vid diagnos av infektioner.

    Serologisk diagnostik - snabb och prisvärd

    Blodprov

    I början av 1900-talet upptäcktes en serologisk reaktion av den tyska immunologen August Wassermann, som fortfarande används för att diagnostisera syfilis och bär sitt namn i form av förkortningen RW. Ett blodprov för Wassermans reaktion ingår i listan över obligatoriska studier som utförs för gravida kvinnor och innan några kirurgiska ingrepp..

    Funktioner av Wasserman-reaktionen

    Vilken typ av analys det förklaras ur immunologins synvinkel. Studien utförs med metoden för RSK - reaktionen av komplementbindning. Komplement är en grupp specifika proteiner som är involverade i en komplex kaskad av immunsvar. De är en del av medfödd och förvärvad immunitet. Komplementsystemet är inaktivt tills det aktiveras av ett främmande protein som produceras av invaderande mikroorganismer.

    Den klassiska aktiveringsvägen sker efter kontakt med en bakterie. Ytan har sina egna antigenproteiner. De är främmande för människokroppen; som svar produceras antikroppsproteiner. Komplement är nödvändigt för att stimulera antikroppar, och efter bildandet av ett komplex med antigener blir mikroorganismen synlig för immuna makrofagceller. De absorberar bakterier och främjar läkning.

    Vid infektion med blekt treponema, det orsakande medlet för syfilis, bildas antikroppar i kroppen, som kvarstår under lång tid. Genom deras koncentration kan du bestämma fasen av sjukdomen, vilket visas med ett RW-blodprov.

    Wasserman-analys kräver 5 komponenter:

    • diagnostiserat antigen;
    • diagnostiska antikroppar;
    • indikatorantigen - erytrocyter från får;
    • indikatorantikroppar - kaninhemolysiner;
    • komplement.

    Under formuleringen av reaktionen krävs 2 antigen-antikroppssystem, ett av dem är indikator och det andra är specifikt. Normalt åtföljs interaktionen mellan antigen och antikropp av bindning av komplement, medan ett komplex bildas som inte syns visuellt. Därför krävs ett indikatorhemolytiskt system. Serum sensibiliserar erytrocyter, gör dem känsliga för komplementens verkan. Därför inträffar hemolys i dess närvaro - förfallet av röda blodkroppar, lösningen är färgad.

    Tolkningen av resultaten av ett RW-blodprov baseras på svårighetsgraden av hemolys. Om lösningen behöll sitt ursprungliga transparenta tillstånd betyder det att hela komplementet har bundet till ett specifikt system. Detta är en indikator på förekomsten av antigen-antikroppskomplex, vilket antyder att det finns syfilisantigener i blodserumet, och antikroppar har utvecklats i kroppen mot dem. Detta resultat är positivt.

    I frånvaro av specifika antikroppar mot antigenet i blodet bildas deras komplex inte, och komplementet aktiveras inte och förblir fritt. Det binder till indikatorproteiner, orsakar hemolys av erytrocyter och blandningen i provröret blir röd, vilket innebär att RW-blodprov är negativt.

    RW-blodprovet utförs i ett laboratorium under sterila förhållanden. De biologiska materialen som används och patientens blod genomgår grundlig beredning, de titreras i olika förhållanden med komplement och tillsätter från 0,5 till 0,05 ml av detta protein. Enligt reaktionens intensitet i varje provrör bedöms reaktionens resultat.

    För vem rekommenderas studien?

    Syfilis är en farlig sexuellt överförbar infektion. Efter infektion går de första symptomen ofta obemärkt förbi. Sår uppträder på patogenens penetration. Hos kvinnor kan de förekomma i slidan, på livmoderhalsen, i ändtarmen eller i munnen. De åtföljs inte av obehag, ömhet eller specifik urladdning..

    Om patogenen finns på ljumskans, blygdläpparna eller perineum, är syfilom lokaliserade på samma platser. Sår åtföljs inte av klåda, skalar inte av och går bort på egen hand utan spår. Inga ärr eller pigmentering bildas i stället. Därför går människor inte till läkare..

    Därför har ett obligatoriskt uttryckligt blodprov för RW lagstiftningsvis införts, vilket utförs i följande situationer:

    • alla gravida kvinnor vid registrering, liksom strax före förlossningen;
    • före några invasiva ingrepp, kirurgiska ingrepp, inklusive minimalt invasiva;
    • under den obligatoriska yrkesundersökningen under anställning samt årliga prov.

    Hos gravida kvinnor kan undersökningen utföras dessutom mitt i dräktighetsperioden, vilket är förknippat med särdragen vid bildandet av antikroppar. Om en kvinna drabbats av treponema strax före graviditeten eller i början, kommer immunsystemet inte att ha tid att svara, analysen blir negativ..

    En gynekolog kommer att hänvisa dig till RW om en kvinna vid undersökning avslöjar ett smärtfritt sår på könsorganen, förstorade inguinala lymfkörtlar. En hudläkare eller terapeut kommer att hänvisa till studien för patienter som klagar över förstorade lymfkörtlar och könssår, liksom uppkomsten av ett blekt utslag på kroppen. Självundersökning rekommenderas för tillfälligt samlag, men inte tidigare än 3-4 veckor efter den påstådda infektionen. Detta beror på särdragen hos immunsvaret och inkubationsperioden för treponema..

    Funktioner av syfilisförloppet och bildandet av antikroppar

    Syfilis hänvisar till sexuellt överförbara infektioner, infektion uppstår när sekret från en sjuk persons könsorgan kommer i kontakt med en frisk person. För införande av treponema är det tillräckligt att få det på huden, så de primära elementen uppträder ofta runt anus, på munens slemhinna och på andra ställen där kontakt inträffade.

    Inkubationsperioden kan pågå från en vecka till 190 dagar och beror på immunsystemets individuella egenskaper. Det förkortas hos kvinnor som smittas samtidigt från två källor, men det kan öka om antibiotika från en annan smittsam sjukdom behandlades vid reproduktionsstadiet..

    Från det ögonblick som en hård chancre dyker upp börjar primär syfilis. I genomsnitt varar det 6-7 veckor och är uppdelat i två perioder:

    • seronegativ - ett blodprov för RW, utfört av en mikrometod och andra typer av reaktioner kommer att vara negativa;
    • seropositiv - Wasserman-reaktionen blir positiv, inträffar 3-4 veckor efter uppkomsten av en hård chancre.

    Därför, när man undersöker patienter med misstänkt primär syfilis eller hård chancre, är en negativ RW en anledning att upprepa analysen efter några veckor. Det är i efterhand möjligt att fastställa receptet på infektionen, spåra sexuella kontakter eller hitta den sexpartner som blev infektionskällan.

    Indelningen i seronegativa och seropositiva perioder används för närvarande sällan, eftersom moderna diagnostiska metoder har dykt upp, där patogenen, dess DNA eller antikroppar kan detekteras inom några veckor efter infektion.

    Sekundär syfilis utvecklas 6-7 veckor efter den primära. Det orsakande medlet sprider sig hematogent genom hela kroppen, påverkar de inre organen och ett utslag uppträder på huden. Denna period är indelad i tre andra:

    • tidigt eller friskt - ett primärt utslag på huden, antikroppar har redan utvecklats i kroppen;
    • återkommande - utslag uppträdde igen på grund av försvagning av immunförsvaret;
    • latent - sjukdomen går in i en latent form, som inte syns utåt.

    Tertiär syfilis utvecklas efter många år av sjukdomen utan behandling. För närvarande, på grund av den utbredda användningen av antibiotika och allmän diagnos, är det mycket sällsynt. Det kännetecknas av skador på nervsystemet, ben, brosk, inre organ.

    Bildningen av antikroppar sker i steg. I ett tidigt stadium av sjukdomen uppträder IgA, efter uppkomsten av en hård chancre, finns IgM och efter ett tag IgG. Det speciella med sjukdomsförloppet är att i tertiär syfilis blir immunsvaret mycket svagt och antikroppar kanske inte detekteras i RW-analysen.

    Hur man förbereder sig för studien och vad som påverkar analysens noggrannhet

    Innan du tar testet måste du få en remiss från din läkare. Studien genomförs inte anonymt, eftersom syfilis är en sjukdom som kräver obligatoriskt samlag och behandling av sexuella partners. Det är en avskräckande åtgärd för att stoppa spridningen av sjukdomen..

    Ingen speciell förberedelse för analys krävs. För detektion av antikroppar spelar det ingen roll om blod tas på fastande mage eller inte, men läkare rekommenderar att du inte äter på morgonen och att ge upp alkohol och fet mat på kvällen. Detta stimulerar levern, frisättningen av galla i tarmlumen och en ökning av blodlipider. När man försöker få serum kommer chyleis att hittas, vilket inte tillåter analys.

    Under graviditeten rekommenderas inte en kvinna att äta, men det är tillåtet att dricka vatten. Om hungerstatus tolereras dåligt är det nödvändigt att ta godis eller choklad till kliniken för att äta omedelbart efter att ha donerat blod.

    Insamling av biologiskt material

    För det klassiska RW-testet måste venöst blod doneras. Oftast tas det från armbågsböjningen, men andra tillgängliga fartyg är också tillåtna. Venen från vilken blodet tas tas in preliminärt med en tävling ovanför punkteringsplatsen. Patienten ombeds att knyta näven och rensa den för att öka blodflödet från artärerna. Laboratorieassistenten behandlar huden med en antiseptisk lösning och drar 5-10 ml blod i en steril spruta.

    För vidare forskning erhålls serum från blodet, detta måste göras så snart som möjligt så att aktivering av fibrinogen och koagulering inte sker. Därför fälls de bildade elementen ut och efter tillsats av kalciumjoner blir fibrinogen inaktiv. Samtidigt försvinner antikroppar inte någonstans, så det biologiska materialet är lämpligt för analys.

    Resultat av Wasserman-reaktionen

    RW-analysen tar ungefär en dag. Moderna forskningsmetoder som gradvis ersätter Wasserman-reaktionen när det gäller beredskap är ungefär desamma. Men andra forskningsmetoder ger ett exakt resultat redan i ett tidigt skede av uppkomsten av antikroppar eller gör det möjligt att identifiera patogenens DNA, därför tas blod på RW mindre ofta.

    Under en rutinundersökning före operationen är det nödvändigt att ta hänsyn till hur länge blodprovet för RW är giltigt, så att du på sjukhusdagen inte behöver upprepa undersökningen och vänta på resultaten. Testet är giltigt i 2 månader, liksom test för HIV och hepatit. Men i de fall där analysen lämnas in under preoperativ förberedelse, rekommenderar läkare att ta den en månad före det förväntade datumet för operation eller manipulation, så att om resultatet är positivt, skulle det vara möjligt att genomgå behandling och omprövning..

    Positivt resultat

    Hur mycket RW-blodprov som görs beror på laboratoriets egenskaper, men oftast är resultatet klart nästa dag. Studien syftar till att bestämma de totala immunglobulinerna i klass M och G, bara i detta fall uppnås ett positivt resultat. Men avslutningsvis kan du hitta olika värden som bestämmer antalet "+" -tecken i mängden från 1 till 4. Ju fler plus, ju starkare Wasserman-reaktionen, desto fler antikroppar har patienten.

    I det dermatovenerologiska apoteket, där du måste åka om resultatet är positivt, kommer ytterligare studier att ordineras för att bekräfta eller förneka diagnosen. Var därför inte panik när du får ett positivt svar under den inledande studien, det betyder inte sjukdom.

    Ett positivt test för RW visas under följande förhållanden:

    • med färsk syfilis eller under den primära seropositiva perioden;
    • med sekundär seropositiv syfilis, om infektionen inträffade för mer än 3 månader sedan;
    • med tertiär syfilis under den seropositiva perioden;
    • om mindre än ett år har gått sedan behandlingen
    • med seresistens efter behandling av sjukdomen.

    Ett blodprov för RW används inte bara för att diagnostisera syfilis utan också antifosfolipidsyndrom. Detta är en sjukdom som oftast förekommer hos kvinnor och kännetecknas av bildandet av antikroppar mot fosfolipider. De attackerar embryot, vilket leder till återkommande missfall och tidiga missfall. Men blod på RW kan doneras för diagnos av antifosfolipidsyndrom om frånvaron av syfilis bekräftas.

    Negativt resultat

    Laboratoriets svarformulär kan indikera att resultatet är negativt, vilket innebär inga antikroppar. Men med tanke på särdragen hos sjukdomens patogenes och stadierna av antikroppsbildning är en sådan slutsats inte alltid en indikator på hälsan..

    Om du tar testet under de första 3-4 veckorna efter samlag, under vilken infektion kan ha inträffat, finns det bara klass A-immunglobuliner i kroppen, som inte detekteras under analysen för RW. Under den tidiga seronegativa perioden, när de första symtomen på sjukdomen redan finns, saknas också hela uppsättningen antikroppar som är nödvändiga för ett positivt resultat. Därför tilldelas patienter med misstänkt syfilis, men ett negativt studieresultat, ytterligare tester eller omprövning efter några veckor..

    Ett negativt resultat kan vara när en person har utvecklat ett tertiärt stadium av patologi. I det här fallet finns det uttalade karakteristiska tecken på skada:

    • nervsystem;
    • aorta och andra stora fartyg;
    • ryggrad;
    • ben och muskler
    • slemhinnor;
    • epidermis.

    Sådana patienter lider av minne, uppmärksamhet och tänkande. Diagnos av tertiär syfilis baserat på testresultat är svår.

    Felaktigt resultat

    Hos vuxna indikerar ett positivt RW-test inte alltid infektion. Det finns ett begrepp med en falsk-positiv studie, som är associerad med korsreagerande antikropps särdrag. Falsk RW kan observeras under följande förhållanden:

    • under graviditet;
    • hos patienter med diabetes mellitus;
    • med tuberkulos;
    • hos patienter med cancer;
    • hos dem som lider av kronisk alkoholism;
    • med infektiös mononukleos;
    • leverskada med viral hepatit;
    • med lunginflammation
    • hos patienter med autoimmuna sjukdomar;
    • drogmissbrukare;
    • med gikt;
    • efter infektion med enterovirus;
    • efter nyligen vaccinerad.

    Dessa tillstånd eller sjukdomar kännetecknas av spänningen i immunsystemet, bildandet av ett stort antal antikroppar som kan reagera med komplement i RW-analysen. Därför behöver patienter med ett falskt positivt resultat ytterligare tester. Gravida kvinnor som får en positiv RW testas på ett annat sätt. Ibland erhålls ett falskt positivt resultat vid infektion med andra typer av treponema som inte är relaterade till syfilisens orsakande medel.

    Alternativa forskningsmetoder

    Wasserman-reaktionen läses av en föråldrad forskningsmetod, därför används den sällan. Den ersattes av andra, mer exakta metoder, de kallas vanligtvis RW 2-analysen eller expressmetoden. I vissa kliniker fortsätter formuläret att kalla RW-syfilis-testet, oavsett vilken typ av reaktion som används.

    Alla metoder för att detektera syfilitisk infektion är indelade i direkta, vilket gör det möjligt att upptäcka blekt treponema och indirekt, baserat inte på sökandet efter antikroppar mot patogenen. I de tidiga stadierna, när en person har en sårad chancre eller ett utslag på huden, kan ett prov erhållas från patologiska foci. Forskning kan göras på tre sätt:

    1. PCR - metoden låter dig upptäcka patogenens DNA, och när du använder PCR i realtid reflekteras antalet mikroorganismer. Men för en diagnos är det tillräckligt att få en bekräftelse på närvaron av mikroorganismen. Studie ineffektiv för tertiär syfilis.
    2. Mörkfältmikroskopi syftar till att detektera levande treponemas i det studerade materialet. Laboratorieassistenten kan se en karakteristisk spiralmikrobiell cell som gör translationella rörelser, metodens tillförlitlighet är 100%, men resultatet fungerar inte om det finns blod, pus i materialet eller uttalad inflammation i fokus.
    3. RIT-test är ett dyrt biologiskt test, för vilket laboratoriedjur är kontaminerade med material från en sjuk person, testresultatet ska vänta i flera veckor, så studien används inte för tidig screening.

    På order från Ryska federationens hälsoministerium måste följande metoder användas för att diagnostisera syfilis:

    1. Mikroreaktion av nederbörd är den enklaste och snabbaste forskningsmetoden, som består i bildandet av immunkomplex med antikroppar i patientens blod, de fälls ut i form av vita flingor.
    2. RPHA är en direkt hemagglutinationsreaktion, metodens känslighet är 100%, men vid inflammatoriska sjukdomar kan det finnas ett falskt resultat.
    3. RIF - immunfluorescens, utförd med märkta antikroppar, används i praktiken sällan på grund av den höga kostnaden.
    4. RIBT - immobilisering av bleka treponemas, en dyr studie, som används i sällsynta fall.
    5. ELISA - enzymbunden immunosorbentanalys, en billig och mycket specifik diagnostisk metod, ger ibland falska resultat, i vilket fall en andra studie utförs.

    Den obligatoriska listan inkluderar inte Western blot-testet. Diagnosmetoden används i tveksamma fall när en djupgående studie krävs. En serie långvariga reaktioner krävs för att få ett resultat, så analysen tar ungefär 7 dagar.

    Ett RW-blodprov kan diagnostisera syfilis och initiera behandling för vilken penicillin används. Denna undersökningsmetod får gradvis en historisk karaktär och moderna och snabba uttryckliga tester tar sin plats..