Vad är ett blodprov för ELISA

Utvecklingen av modern medicin i diagnosvärlden upphör aldrig att förvåna med sina prestationer, och nu behöver läkaren inte göra antaganden om den troliga diagnosen, och förlitar sig bara på indirekta tecken. Skapandet och introduktionen i laboratorievärlden av den enzymbundna immunosorbentanalysen (ELISA) gör att du snabbt och noggrant kan bestämma inte bara förekomsten av patogenen utan också många andra egenskaper hos sjukdomen.

Historia om skapande och utveckling av IFA

Denna metod för blodprovning började användas i praktisk medicin redan i mitten av förra seklet - någonstans på 60-talet. Dess ursprungliga mål var vetenskaplig forskning inom histologi, som var begränsad till sökandet och studien av den cellulära antigena strukturen hos biologiska arter. Blodtestet med ELISA är baserat på interaktionen mellan besläktade antigener (AG) och specifika antikroppar (AT), med bildandet av ett "antigen-antikropp" -komplex, bestämt av enzymet.

Detta fenomen fick forskare att bestämma att metoden kan användas för att känna igen proteinföreningar av olika klasser som bildas i blodserum när en patogen kommer in i kroppen. På grund av deras direkta engagemang i immunsystemets funktion kallas dessa föreningar immunglobuliner (Ig, Ig), och upptäckten var det största genombrottet inom laboratoriediagnostik..

Samtidigt började denna mycket känsliga metod endast användas aktivt på 80-talet, och den var endast tillgänglig i högspecialiserade medicinska institutioner. De allra första kunde använda enzymimmunanalysanalysatorer på stationer och blodtransfusionscentra, könsorgan och smittsamma medicinska institutioner. Detta berodde på den snabba spridningen av "1900-talets pest" - AIDS, och akuta diagnostiska och terapeutiska åtgärder krävdes..

Möjligheter för tekniken

Användningsområdet för blodprovet för ELISA är ganska brett - för närvarande är det omöjligt att föreställa sig hur komplicerad sökandet efter orsaken till många sjukdomar skulle vara. Sådan forskning används nu i nästan alla medicinska områden, även inom onkologi. Även om det är svårt för oinformerade att förstå, i vissa fall, efter att ha utfört det, var det möjligt att rädda patienternas liv, efter att ha upptäckt en tumör i de tidiga stadierna..

I moderna diagnostiska centra representeras laboratorieundersökningar inte bara av tumörmarkörer - de är utrustade med en imponerande arsenal av paneler för att utföra denna diagnos. Med deras hjälp är det möjligt att bestämma många patologiska tillstånd, såsom hormonella abnormiteter och infektiösa processer av olika ursprung..

Dessutom kommer genomförande och avkodning av ett ELISA-blodprov att göra det möjligt att spåra effekten av läkemedel på kroppen hos en sjuk person och till och med ett djur. Det senare används i stor utsträckning i veterinärkliniker, vilket hjälper till att bibehålla hälsan hos våra husdjur eller försörjare, vilket ger en stabil leverans av kött, mejeriprodukter och ägg som inte kan ersättas i kosten..

Så, som ett resultat av att endast ta några milliliter venöst blod och dess diagnos med ELISA-metoden, kommer läkaren, efter att ha beskrivit forskningsmaterialet, att kunna bestämma:

  • hormonellt tillstånd, inklusive biologiskt aktiva substanser i könsorganen och sköldkörteln, såväl som binjurarna;
  • förekomsten av bakterie- och virusinfektioner (hepatit B och C, syfilis, herpes, klamydia, tuberkulos, myko- och ureaplasmos, HIV, TORCH) och andra sjukdomar av denna art;
  • tecken på vital aktivitet hos patogener i den patologiska processen, som slutade i återhämtning och passerade in i antikroppsbildningsstadiet (immunsvar).

Sådana komplex är mycket lättare att känna igen och eliminera av immunceller. Återstående effekter i form av antikroppar finns i flera fall i blodet för livet, vilket praktiskt taget minskar riskerna för återinfektion till noll.

Varianter av immunglobuliner

Det finns flera typer av antikroppar, och var och en av dem är involverade i immunsvaret i ett visst skede. Exempelvis är immunglobuliner av klass M (IgM) de första som bildas som svar på inträde av högt blodtryck i kroppen. Deras högsta andel observeras under de första dagarna av sjukdomen..

Sedan lanserar immunsystemet klass G Ig (IgG) i plasma, som är ansvariga för fullständig förstörelse av antigener och patientens återhämtning. Senare fortsätter de att vara i blodet och förbereder därmed immuniteten för en upprepad träff av en identisk patogen. Så här fungerar vaccination. Med införandet av försvagade antigener från patologiska mikroorganismer dyker många immunglobuliner upp och förblir cirkulerande i plasma.

Och därefter, om patogen kontakt uppstår, hanterar de snabbt infektionen och räddar kroppen från hälsorisker. IgA koncentreras i stora mängder i slemhinnorna, vilket blockerar inträde av patogena virus och bakterier i kroppen. IgE är ansvariga för att döda parasitinfektioner, och det finns många andra immunglobuliner involverade i immunsvaret.

Huvudobjekten av intresse för laboratoriediagnostik är Ig-klasserna M, G och A. På grund av koncentrationsnivån kan du bestämma sjukdomsstadiet och ta reda på vilka smittsamma sjukdomar en person har haft i sitt liv. Du kan till exempel kontrollera om det fanns en historia av vattkoppor eller röda hund. För att ta reda på om en viss typ av AT eller AH finns i patientens kropp eller koncentrationen av något hormon behöver läkaren inte förskriva flera laboratorieundersökningar - det räcker att skriva en remiss för ELISA.

Kärnan i tekniken

En enzymbunden immunosorbentanalys för parasiter och andra mikroorganismer - skadedjur av kroppens hälsa gör det möjligt att inte bara fastställa förekomsten av patogener utan också berätta om deras antal i patientens blodplasma. Således möjliggör en sådan studie både kvalitativ och kvantitativ analys av patogena mikroorganismer som finns i serumet..

Patogenens koncentrationsnivå påverkar signifikant utvecklingen av infektion och återhämtningshastigheten, därför anses en kvalitativ bedömning inte vara mindre viktig än en kvantitativ. Hon ges långt ifrån den sista rollen i behandlingen av barn och vuxna. Men hur kan det hända att ELISA kan känna igen ett så stort antal mikroorganismer som parasiterar människors och djurs kropp, orsakar skada och minskar livskvaliteten??

Forskningsmetoden bygger på flera alternativ (direkt och indirekt - konkurrenskraftig och icke-konkurrenskraftig) för att utföra de tilldelade uppgifterna, som alla är avsedda för specifika ändamål. Detta tillvägagångssätt möjliggör en riktad sökning och på kortast möjliga tid att identifiera orsaken till en viss patologi. För detektion av Ig av olika klasskategorier används en 96-brunnars platta (polystyrenpanel) och sorberade rekombinanta proteiner finns i dess brunnar. De spelar rollen som antigener och är i början i den fasta fasen.

När det kommer in i brunnen med blodplasma identifierar antigener eller antikroppar föremålet i samband med deras orientering och bildar ett komplex (AG - AT). Denna bildning fixeras av en enzymatisk förening (konjugat), som därefter kommer att manifestera sig som en förändrad färgning av brunnen. ELISA produceras på specifika testsystem tillverkade i specialiserade laboratorier och utrustade med en komplett uppsättning reagenser.

Denna analys kan utföras på brickor - brickor och spektrofotometeravläsningar, men de kräver manuellt arbete. Naturligtvis är det flera gånger bekvämare och snabbare för en laboratorieassistent att utföra alla manipulationer på helt automatiserade enheter. Vid användning av dem frigörs laboratoriepersonal från en stor mängd monoton aktivitet - tvätt, instillning och resten av rutinen, men inte alla medicinska institutioner har råd med så dyr utrustning

Tolkning av forskningsmaterial är uteslutande kompetensen hos en laboratoriediagnostiker - bara han kan få veta resultaten om detaljerna och finesserna i sjukdomsförloppet. I detta fall måste läkaren ta hänsyn till möjligheten att få falska negativa eller falska positiva svar..

Avkodning av material

Resultatet av en högkvalitativ enzymimmunanalys bör vara en entydig slutsats om den önskade mikroorganismen hittades eller inte i detta blodprov. Kvantitativ analys kommer att indikera koncentrationsnivån och kan uttryckas på två sätt - genom värde i antal eller med antalet "+" tecken.

Analyserade indikatorer

Under forskningen genomförs en noggrann studie av de viktigaste immunglobulinerna som är involverade i immunsvaret, såsom:

  • IgM - detektion av denna klass betyder utveckling av en akut form av en infektionssjukdom. Ett negativt resultat i sökandet efter IgM kan vara både bevis på frånvaron av den önskade patogenen och övergången av sjukdomen till en kronisk kurs.
  • IgA - bestämning av denna klass i frånvaro av IgM i de flesta fall, en signal om en kronisk eller latent form av utveckling av en infektiös sjukdom.
  • IgM och IgA (samtidig närvaro) - positiva resultat för båda typerna indikerar toppen av den akuta formen av patologi.
  • IgG - dess närvaro indikerar omvandlingen av sjukdomen till en kronisk form eller återhämtning och bildandet av immunitet mot det bestämda medlet.

Framväxten och ackumuleringen av en viss klass av IS sker vid olika tidssteg. Så, till exempel, uppträder IgM först, cirka 5 dagar efter att patogenen träffar. IG förblir i blodet i cirka 5-6 veckor och försvinner sedan gradvis. För närvarande är de tillgängliga för bestämning av ELISA. Cirka 3-4 veckor efter sjukdomsdebut uppträder IgG, som därefter kan stanna i flera månader. Men i analysen finns de inte alltid.

IgA bildas i blodet under 2-4 veckor, medan 20% av dem finns i serumet och 80% i utsöndringen av slemhinnorna. Dessa immunglobuliner försvinner som regel inom 2-9 veckor, vilket indikerar förstörelsen av patogenen och patientens återhämtning. Om ELISA fortfarande visar närvaron av IgA, signalerar detta processens övergång till en kronisk form..

Analysalternativ

Beroende på de mottagna uppgifterna kan ELISA-svar utfärdas på ett formulär i form av en tabell med en fullständig lista över alla AT och AG och en indikation på en positiv eller negativ reaktion. I vissa situationer visas ett kvantitativt värde - ett kraftigt positivt, positivt, svagt positivt eller negativt resultat. Det andra alternativet anger mängden antikroppar som ingår i det studerade blodprovet.

Förutom ovanstående värden undersöks en annan kvantitativ parameter i ELISA-processen - AT-aviditetsindex, beräknat i procent. Det visar hur länge sjukdomen varar - det vill säga ju högre indikator desto mer tid utvecklas patologin.

Alternativ ELISA-metod

En enzymimmunanalys är en ganska känd och vanlig diagnos. Kanske har vissa aldrig hört talas om det, men det finns en annan version av denna studie som är ännu mindre känd för ett stort antal människor, där ett prov av icke-blod tas. Denna teknik kallas analys av avföring för ockult blod, och i många fall gör det att du kan undvika ytterligare ansträngande procedurer, som också åtföljs av obehagliga känslor..

Ett ELISA-test för ockult blod (hemoglobinmolekyler) gör det möjligt att upptäcka blödning i matsmältningssystemet, till och med obetydlig, vars tecken i patientens avföring, som de säger, inte kan hittas med blotta ögat. En enzymbunden immunosorbentanalys i human avföring på kort tid kan visa magsår, polypos, divertikulos, tumörer som inte åtföljs av vissa symtom i de tidiga stadierna.

Hittills har tusentals varianter av enzymimmunanalystestsystem skapats som ger möjlighet att hitta AT och AG i en enorm lista med patologier. Därför används denna analys i nästan alla läkemedelsgrenar, för alla åldersgrupper. Och den absoluta ofarligheten gör att du kan tillgripa det både under graviditeten och för diagnos av försvagade patienter.

ELISA-analys: vad är det? varför behövs det? fördelar och nackdelar med metoden

ELISA-analys - vad är det? Det fullständiga namnet på denna diagnostiska metod kallas en enzymbunden immunosorbentanalys, och den baseras på bestämningen i perifert blod av antikroppar i olika klasser, eller immunglobuliner, som produceras av människokroppen..

I läkarutövandet tar ELISA-analysen en mycket viktig plats när det är nödvändigt att diagnostisera smittsam patologi. Denna analys visar inte bara förekomsten av en smittsam sjukdom utan också scenen i den patologiska processen. Inte bara i förhållande till patogenen är ELISA-metoden indikerad för användning: den används för att diagnostisera allergiska tillstånd. Detta test gör att du kan identifiera problem i immunsystemet, i många sjukdomar i det hematopoietiska systemet, autoimmuna och andra störningar.

Varför behövs IFA?

Alla forskare är benägna att tro att namnet "antikropp" är för olyckligt. Ändå speglar det en viktig egenskap hos immunglobuliner: de kan binda och neutralisera skadliga ämnen och närma sig dem som en "nyckel" till ett "lås". Mängden antikroppar i blodet återspeglar inte bara kroppens allmänna förmåga att skydda mot infektioner utan också förmågan att bilda cirkulerande immunkomplex som kan uppstå vid olika autoimmuna sjukdomar, till exempel med reumatoid artrit eller ankyloserande spondylit..

Komplex av antikroppar med ett antigen (en skadlig faktor av infektiös natur) är resultatet av kroppens svar på införandet av "outsiders". Därför lär sig immunsystemet att känna igen dem, med hjälp av lymfocyter, det tränar immunkompetenta celler, och de kan producera mycket specifika antikroppar. Så, antikroppar mot Epstein-viruset är ordnat annorlunda än antikroppar mot viral hepatit C, eller mot E. coli, och anti-HAV, eller antikroppar mot hepatit A-virus - annorlunda än autoantikroppar mot broskvävnad. Det är den höga specificiteten och överensstämmelsen mellan immunglobuliner och ett infektiöst medel som gör ett högt värde för sådan laboratorieforskning som ett enzymimmunanalys.

Efter en stark anslutning av antikroppar och antigener till ett enda komplex (antigen-antikropp) förlorar skadliga faktorer sin förmåga att skada kroppens vävnader, och sedan neutraliseras dessa komplex eller lyseras av fagocytos av neutrofiler och, "smälter", lämnar kroppen.

Ett ELISA-blodprov kan visa vilken specifik patogen faktor vår kropp står inför, i vilket skede är processen för interaktion mellan kroppen och infektionen. Efter studien kan läkaren göra en prognos med hög grad av självförtroende, ordinera vissa typer av behandling och i vissa fall till och med bestämma patientens förväntade livslängd, särskilt vid kroniska virusinfektioner, till exempel vid viral hepatit C.

Men i vissa fall finns det inga smittämnen i kroppen alls, och antikroppar "av misstag" attackerar sina egna organ och vävnader, eftersom immunkompetenta celler fick falsk information. Sådana sjukdomar kallas autoimmun, och ett enzymimmunanalys hjälper också till att känna igen denna kroniska patologi och hjälpa till med diagnos.

Mer om immunglobuliner

Totalt producerar människokroppen 5 kända klasser av antikroppar, vilka betecknas Ig (som står för immunglobuliner), som tillhör klass A, M, G, E och D. Alla är av stor vikt vid tolkningen av resultaten av ELISA-analys. Naturligtvis finns det mycket mer komplex, och inte alla är fortfarande öppna. Men vid diagnosen av olika sjukdomar är de tre första typerna av antikroppar mest värdefulla. Ett blodprov för ELISA använder så mycket information som möjligt: ​​det ögonblick som antikropparna dyker upp i blodet, förändringen i deras koncentration beroende på tid, försvinnandetiden samt typen av specifika antikroppar.

Så, deltagarna i den primära, akuta infektiösa processen är immunglobuliner i klass M, som alltid indikerar en akut fas, även om sjukdomen raderas kliniskt. Ett typiskt exempel är den anikteriska formen av akut viral hepatit B eller C. En enzymimmunanalys för hepatit visar att en person har akut hepatit och symtom som smärta i hypokondrium, muntorrhet, värkande leder och andra ospecifika symtom blir lätt att förstå.

Efter några veckor finns dessa antikroppar i en alltmer försvinnande koncentration, vilket ger immunglobuliner av klass G. De bestäms i blodet i många månader, och till och med år, och indikerar antingen återhämtning, och sedan kan de förbli för livet och bilda stark immunitet. Detta indikerar ett kraftfullt skydd mot patogenantigener. Så det är antikroppar av denna klass som gör en person immun mot upprepade fall av mjältbrand och pest. Men det finns tillfällen då dessa antikroppar inte förhindrar deras skadliga effekter i närvaro av antigener. I det här fallet kan vi prata om en ökning av aktiviteten i en kronisk process..

När det gäller IgE, har den tillämpning vid diagnos av olika parasitiska invasioner och allergiska tillstånd, och IgD utför en hjälpfunktion: den enzymbundna immunosorbentanalysen möjliggör dess användning vid den komplexa diagnosen av astma och autoimmuna tillstånd. Naturligtvis är det mycket mer komplicerat att dechiffrera ELISA-analysen och specialister - immunologer kan berätta mycket mer. Vad är indikationerna på att en patient självständigt kan ansöka till laboratoriet för att utföra forskning?

Indikationer för analys

Först och främst måste du förstå att det inte finns någon sådan analys - ”bara blod för ELISA”. Det finns en analys för hepatit, det händer - för ureaplasma eller för syfilis. Således kan donering av blod för ELISA endast riktas genom att "beställa" sökningen efter önskad infektion. Det är bara så obegripligt varför donera blod från en ven utan att veta vad man ska leta efter. Det är därför enzymimmunanalysen är ett kraftfullt verktyg som är viktigt vid diagnostisk sökning. Endast en läkare kan ordinera denna analys, eftersom han medvetet letar efter en infektion som kännetecknas av dessa symtom. En vanlig person kan naturligtvis beställa 150 blodprover med ELISA-metoden för "alla infektioner", men detta skulle vara ett orimligt och kostsamt tillvägagångssätt för diagnos och ta tester för allt.

Det mest efterfrågade utnämningen av dessa tester för följande sjukdomar och tillstånd:

Olika mikrobiella och virusinfektioner, symtom på infektionssjukdomar - utslag, feber, gulsot, svullna lymfkörtlar, diarrésyndrom, misstänkt sexuellt överförbara sjukdomar.

ELISA-tekniken hjälper till att bestämma ureaplasma och mykoplasma, syfilis och klamydia, tuberkulos och cytomegalovirusinfektion, herpes, viral hepatit och Epstein-Barr-viruset. För närvarande kan cirka 500 olika infektioner verifieras med enzymimmunanalysen.,

Om du misstänker en helminthisk invasion och förekomsten av symtom som allergier, eosinofili i blodet, klåda, dyspepsi och viktminskning,

Läs mer om denna typ av forskning i artikeln "Blodprov för maskar och parasiter: forskningsmetoder, ELISA, till vem och hur man donerar?".

Vid upptäckt av allergener som orsakar angioödem, urtikaria, andfåddhet och astmaattacker.

I det här fallet upptäcks specifik Ig E, och det finns hela allergipaneler som hjälper till att exakt bestämma allergenet - bläckfisk eller räkor, torrfoder för fisk som innehåller dafnier, husdamm. Med hösnuva låter den här metoden dig hitta exakt spannmål, buske eller träd som orsakar vårnysningar och lakrimation.,

  • Denna metod visas vid misstankar om autoimmuna sjukdomar som behandlas av reumatologer,
  • Om tumörtillväxt och aktivitet misstänks,
  • I komplex diagnostik av immunbristtillstånd och HIV-infektion,
  • För blodsjukdomar och i transplantologi, för en omfattande bedömning av immunitet, till exempel före lever- eller njurtransplantation.

Nu vet vi varför du behöver donera blod för ELISA. Ta reda på hur denna studie genomförs.

Hur analysen görs?

Det klassiska materialet är patientens venösa blod. Men om det behövs kan du undersöka ett brett utbud av vätska och vävnad: slem, saliv, livmoderhalssekretioner, cerebrospinalvätska, glasögon i ögat, innehållet i navelsträngen och fostervatten. Det är viktigt att komma ihåg att intag av olika mediciner, överdriven fysisk aktivitet, alkoholmissbruk kan snedvrida testresultaten.

Det finns flera metoder som tillåter denna analys. Den vanligaste metoden i kliniska laboratorier är den fotometriska metoden. I det här fallet används ämnen märkta med färg, efter vilken reaktionen, och markeringen av antigen-antikroppskomplexet, deras färgförändringar. Som ett resultat ändras också den optiska densiteten hos lösningen, och denna förändring är direkt proportionell mot koncentrationen av de detekterade antikropparna. Laboratoriespektrofotometrar används framgångsrikt för att mäta dessa avvikelser.

För ELISA används också en fluorometrisk metod som baseras på fluorescens. Även här beräknas intensiteten av de fluorescerande ämnena som har lagt sig på de undersökta proverna..

Slutligen använder immunologisk analys elektrokemiska metoder för att bestämma aktiviteten hos enzymer, vilka är specifika märken för antigener och antikroppar. Enzymimmunanalysen involverar oftast användningen av enzymer såsom alkaliskt fosfatas, pepparrotsperoxidas och galaktosidas. Dessa enzymer kan binda till antikroppar eller antigener och markera dem på grund av deras aktivitet.

Nackdelar med metoden och dess fördelar

De uppenbara "plus" inkluderar den demokratiska kostnaden för analysen, möjligheten att använda screening i stora grupper av befolkningen, till exempel när man undersöker gravida kvinnor för HIV. Metoden för enzymimmunanalys är ganska specifik och kan användas för att kontrollera kvaliteten på behandlingen för många sjukdomar. Det är viktigt att analysen förbereds snabbt och är enkel och säker för patienten..

Det finns dock många fallgropar. Så om immunglobuliner inte detekteras betyder det inte 100% frånvaro av sjukdomen. I själva verket mot bakgrund av immunbrist kanske kroppen helt enkelt inte "har styrkan" att syntetisera antikroppar. Om en patient har svårt leversvikt kan levern helt enkelt inte syntetisera protein, byggstenen för antikroppar. I det här fallet kallas resultatet seronegativ, och bekräftelse av infektionen krävs med en direkt och mest avancerad forskningsmetod - PCR eller polymeraskedjereaktion. Till skillnad från enzymbunden immunosorbentanalys avslöjar inte denna metod kroppens svar på den infektiösa processen (som kan vara defekt eller helt frånvarande), med PCR bestäms det ärftliga materialet direkt, eller patogenen själv lokaliseras.

Enzymimmunanalysmetoden kan ge ett fel mot bakgrund av många kroniska sjukdomar, mot bakgrund av immunsuppressiv terapi. I helmintologi och parasitologi finns det en lag: endast upptäckt av en parasit, eller dess ägg, är ett absolut tillförlitligt sätt att ställa en diagnos. ELISA kan tillhandahålla kors- och falskt positiva metoder som svarar på många normala händelser i patientens liv.

Sammanfattningsvis måste det sägas att den enzymbundna immunosorbentanalysen är en kraftfull men hjälpprocess för laboratoriediagnos av många sjukdomar. Men under alla omständigheter bör diagnosen baseras på många faktorer: patientens klagomål och anamnes, undersökningsdata och andra diagnostiska metoder för hjälp och instrument..

Vad är enzymimmunanalys?

Med utvecklingen av modern medicin är det möjligt att utföra mer fördjupad diagnostik vid misstankar om vissa patologier hos en patient. En av de informativa metoderna för laboratorieforskning var ELISA-analysen, som utförs med metoden för provtagning av venöst blod. För patienten förändras ingenting i allmänhet. Men ELISA laboratorieanalysator genomför en komplex teknik för att studera det insamlade biomaterialet. Vad är ELISA-analyser och vilka finesser är det att använda ELISA-metoden som diagnostisk, vi förstår materialet nedan.

Vad är enzymimmunanalys?

En enzymbunden immunosorbentanalys är en av metoderna för laboratoriediagnos, som enbart baseras på en reaktion som kallas "antigen-antikropp". Här är det värt att förstå att ett antigen är en främmande proteinförening (molekyl) som har kommit in i människokroppen med en parasitisk, viral eller annan infektion. Det är, det är helt enkelt ett skadedjur. I sin tur är en antikropp en immuncell (immunglobulin) som skyddar människokroppen när främmande molekyler finns i den.

Produktionen av antikroppar framkallas av själva antigenerna, som har trängt igenom människokroppen. När man går in i "striden" för kroppens hälsa verkar antikroppar markera antigenerna, vilket är vad laboratorieassistenten ser när man undersöker blodet. Det vill säga i det insamlade biomaterialet är det möjligt att spåra inte bara förekomsten av infektion utan också dess spår efter att kroppen har återhämtat sig helt..

När ett ELISA-test utförs kan en laboratorieassistent se följande immunglobuliner mot antigener:

  • Immunglobuliner M (listade som IgM i resultaten). De indikerar att den smittsamma processen i kroppen bara får sin styrka. Det vill säga infektionen hände ganska nyligen;
  • Immunglobuliner G (listade som IgG). Bidra till förstörelsen av antigener några dagar efter infektionen i människokroppen. Immunglobuliner G kan finnas i patientens kropp under lång tid och bilda immunitet mot ett visst virus;
  • Immunglobuliner E (listad som IgE). Ange parasitinfektioner i kroppen. Han talar också om atopiska reaktioner vid allergier. Det är värt att veta att ett ELISA-test ger ett resultat med en noggrannhet på 90% för parasitinfektioner;
  • Immunoglobuliner A (listade som IgA). Skydda patientens slemhinnor så mycket som möjligt.

Genom att förskriva en enzymlänkad immunosorbentanalys till en patient kan den behandlande läkaren således spåra infektionens varaktighet, graden av dess progression eller avslöja närvaron av immunitet mot en viss infektion..

ELISA-diagnostikprocessen ser ut så här:

  • Det uppsamlade venösa blodet förs till tillståndet för blodserum i laboratoriet;
  • Sedan använder laboratorieassistenten en speciell bricka med celler, som alla redan innehåller alla nödvändiga antigener. Det räcker bara att släppa blodserum i varje cell och spåra reaktionen av immunglobuliner (antikroppar) mot antigener. Närvaron av den "önskade" reaktionen framgår av en förändring i testmaterialets färg. Därefter studerar laboratorieassistenten den undersökta mediets optiska densitet.

Generellt hjälper ett enzymimmunanalys för parasiter att identifiera sådana parasitiska patologier:

  • Ascariasis och enterobiasis (rundmaskar och pinworms);
  • Trikinos;
  • Opisthorchiasis i akuta och kroniska former;
  • Giardiasis;
  • Amebios;
  • Toxoplasmos;
  • Leishmaniasis i någon form.

Viktigt: enzymimmunanalys är både kvalitativ och kvantitativ. I det första fallet bekräftar eller motbevisar laboratorieassistenten bara förekomsten av den önskade substansen i blodet. I det andra fallet, som ett resultat av analysen, anges dess koncentration i patientens kropp.

Nackdelar med metoden

Med alla fördelarna med denna diagnostiska metod bör det förstås att en enzymbunden immunosorbentanalys inte är ett sätt att hitta orsaken till en patients sjukdom, utan bara en metod för att bekräfta den diagnos som den behandlande läkaren föreslår. Och eftersom forskning inte är tillräckligt billig måste du använda den klokt. Dessutom bör resultaten av studien endast tolkas av en kvalificerad specialist..

Förbereder sig för parasitprovning

Det är viktigt att förstå att identifiering av parasiter genom ett blodprov kräver en viss förberedelse från patienten. Så innan du donerar blod måste du göra följande:

  • Dagen före provtagningen av biomaterialet måste fet mat, alkohol och rökt kött uteslutas från kosten.
  • Blod för en enzymbunden immunosorbentanalys för parasiter och andra infektioner ska tas på morgonen på fastande mage;
  • Innan du donerar blod är rökning förbjudet i minst 3-4 timmar.
  • På dagen för blodprovtagning är det tillrådligt att inte vara nervös och inte tillgripa ökad fysisk aktivitet.

Överensstämmelse med dessa regler kommer att undvika ett falskt positivt resultat för antikroppar mot parasiter..

Avkodning av resultaten

När vi har ordnat upp förkortningen ELISA och vad det är ─ har upptäckt är det värt att gå vidare till tolkningen av resultaten. Det är viktigt att förstå här att om analysen var kvalitativ, blir resultatet bara positivt eller negativt. Det vill säga diagnosen bekräftar antingen läkarens misstankar om en viss diagnos eller motbevisar dem. I det här fallet innehåller formuläret symbolerna "+" respektive "-".

Viktigt: ett negativt testresultat indikerar inte alltid frånvaron av infektion. Faktum är att antikroppar mot antigener kan bildas inom 14 dagar efter infektion och det är troligt att de ännu inte har bildats.

Om en kvantitativ analys utförs bestäms här typen av antikroppar, deras mängd och aktivitetsstadium. I synnerhet med en sådan diagnos bestäms antikroppar (immunglobuliner) IgG och IgM, som bildas vid olika perioder av infektionens progression. De vanligaste resultaten i detta fall är:

  • Ökad IgM och fullständig frånvaro av IgG. Denna bild indikerar nyligen infektion och den akuta fasen av patologin..
  • Ökad aktivitet hos båda typerna av immunglobuliner (IgM och IgG). Talar om en långvarig och kronisk kurs i den smittsamma processen.
  • IgG-aktivitet och fullständig frånvaro av IgM. Infektionen var minst sex månader sedan och nu är viruset i ett långvarigt kroniskt stadium.
  • Brist på IgG- och IgA-antikroppar. Resultat odefinierat.
  • Brist på IgM-, IgA- och IgG-antikroppar. Indikerar brist på immunitet mot en specifik infektion.
  • Aktiviteten av IgG-, IgM- och IgA-antikroppar indikerar en förvärring av den kroniska processen.

Förutom att identifiera typerna av antikroppar anger laboratorieassistenten i en speciell kolumn i formuläret deras antal på volymen blod. Kom ihåg, efter att ha förstått vad ELISA-metoden är, ska du inte tolka resultaten själv. De erhållna resultaten kan endast tolkas med noggrannhet av den behandlande läkaren, beroende på den påstådda diagnosen, byggd på grundval av patientens kliniska bild..

ELISA blodprov

En enzymbunden immunosorbentanalys (ELISA) utförs för en omfattande bedömning av kroppens skyddande funktioner. Under studien bestäms antalet och egenskaperna hos immunceller, närvaron av nödvändiga antikroppar. ELISA-blodprov utförs för att diagnostisera infektiösa, hematologiska, autoimmuna sjukdomar, primär och sekundär immunbrist. Tänk på vad som utgör ett ELISA-blodprov och vilka indikationer som finns för denna studie.

Vad det är

Ett ELISA-blodprov är ett laboratorietest som upptäcker antikroppar eller antigener i ett blodprov. Denna studie används för att detektera nivån av immunglobuliner, immunologiska komplex, hormoner.

Indikationer för analys

För utnämning av ett ELISA-blodprov finns följande indikationer:

  • diagnos av sexuellt överförbara infektioner - ureaplasma, mycoplasma, klamydia, trichomonas, syfilis;
  • diagnos av virussjukdomar - cytomegalovirus, herpes, hepatit, Epstein-Barr-virus;
  • bestämning av hormonnivåer;
  • diagnostik av onkologiska sjukdomar;
  • definition av immunbrist;
  • diagnos av allergier;
  • preoperativ omfattande undersökning före organtransplantation;
  • utvärdering av terapins effektivitet.

Metodprincip

Funktionsprincipen för den enzymbundna immunosorbentanalysmetoden baseras på bestämningen av specifika proteinantikroppar i blodet - immunglobuliner. Immunglobuliner produceras av det mänskliga immunsystemet när antigener (främmande mikroorganismer) tränger in i kroppen. Dessa immunmolekyler binder till och neutraliserar många smittsamma ämnen i kroppen..

Immunglobuliner har en viktig egenskap - specificitet. Tack vare detta kan de binda till ett specifikt antigen och bilda ett antigen-antikroppskomplex. Under ELISA-blodprovet är det detta komplex som bestäms kvalitativt och kvantitativt.

Det finns fem klasser av immunglobuliner. Men vanligtvis definieras tre klasser - immunglobuliner A, M, G. Dessa antikroppar ackumuleras i kroppen vid olika tidpunkter från infektionsögonblicket.

  • Immunglobuliner av klass M (IgM) uppträder allra första i blodet den femte dagen från infektionsögonblicket. De förblir i kroppen i 5-6 veckor och försvinner sedan från blodomloppet. IgM-antikroppar indikerar en akut period av sjukdomen eller förvärrar sjukdomen i dess kroniska förlopp.
  • Cirka 3-4 veckor efter infektion uppträder immunglobuliner i klass G (IgG) i blodet. De kan finnas i mänskligt blod i flera månader eller till och med år. Enligt utskriften av ELISA-blodprovet, om mängden IgG-immunglobuliner ökas i två blodprover tagna i följd två veckor senare, talar de om en aktuell infektion eller reinfektion - återinfektion med samma infektion.
  • Immunglobuliner av klass A (IgA) kan detekteras med denna forskningsmetod 2-4 veckor efter infektion eller förvärring av en infektiös sjukdom. Av dessa cirkulerar endast 20% i blodet, resten ligger i utsöndringen av slemhinnorna. IgA-antikroppar försvinner från blodomloppet inom 2-8 veckor efter förstöring av smittsamma ämnen. Försvinnandet av dessa immunglobuliner innebär ett botemedel mot infektionen. Om förekomsten av IgA-antikroppar i blodet bestäms efter sjukdomens slut betyder det att sjukdomen har gått över i ett kroniskt stadium.

Förberedelse för analys

För analys av blod med ELISA används oftast humant blod. Men du kan också undersöka innehållet i glaskroppen, cerebrospinalvätska, fostervätska.

Ett blodprov för forskning tas från patienten från kubitalvenen. Det rekommenderas att donera blod på fastande mage (minst 12 timmar bör gå sedan den senaste måltiden). Det är nödvändigt att informera läkaren om patienten tar mediciner, eftersom vissa av dem kan ändra testresultatet. Studieresultatens tillförlitlighet påverkas av intag av alkohol och droger.

Avkodning

Formen för resultatet av denna analys indikerar ett positivt (+) eller negativt (-) resultat av bestämningen av varje klass av immunglobuliner.

Tänk på tolkningen av en möjlig tolkning av ELISA-blodprovet.

  • Negativt IgM, IgG, IgA-resultat - brist på immunitet mot infektion.
  • Negativ IgM, IgA och positiv IgG - immunitet efter infektion eller efter vaccination.
  • Negativ eller positiv IgG, IgA och positiv IgM - akut infektion.
  • Positivt resultat av IgM, IgG, IgA - förvärring av en kronisk infektionssjukdom.
  • Negativ IgM och negativ eller positiv IgG, IgA - kronisk infektion.
  • Negativt IgM-resultat och IgG kan inte detekteras, IgA - återhämtning.

Metodfördelar

ELISA-blodprovet har många fördelar. De viktigaste kan urskiljas:

  • relativt hög noggrannhet (känslighet);
  • möjligheten till tidig diagnos;
  • förmågan att spåra dynamiken i den smittsamma processen;
  • en hög nivå av enande, vilket möjliggör massundersökningar;
  • en kort tidsperiod som krävs för att få analysresultatet;
  • enkel användning;
  • automatisering av alla analysfaser;
  • relativt låg kostnad.

nackdelar

Nackdelen med ELISA är att det ibland ger falskt negativa eller falskt positiva resultat. Förutom tekniska fel under studien kan orsaken till falska resultat vara patientens reumatoid faktor, närvaron av kroniska sjukdomar (där antikroppar produceras), metaboliska störningar och intaget av vissa mediciner.

ELISA blodprov för parasiter

Med hjälp av denna blodprovsmetod bestäms närvaron av följande parasitiska processer i kroppen:

  • ascariasis;
  • trikinos - analysen utförs flera gånger, den maximala nivån av antikroppar bestäms 4-12 veckor efter infektion;
  • cysticercosis;
  • teniasis;
  • fascioliasis - antikroppar bestäms i det akuta stadiet av sjukdomen;
  • opisthorchiasis - utför differentiell diagnos mellan kroniska och akuta former av sjukdomen;
  • giardiasis;
  • visceral och kutan leishmaniasis;
  • amebiasis;
  • toxoplasmos.

ELISA-blodprov för parasiter används för att detektera antigener (parasiter och deras metaboliska produkter) och antikroppar (immunglobuliner). Immunglobuliner produceras i kroppen som antikroppar mot antigener. Specificiteten för denna metod för att bestämma parasiter är 90%. Med hjälp av denna analys är det möjligt att bestämma typen av parasiter, deras antal och, tack vare nivån av antikroppar, spåra dynamiken i processutvecklingen.

ELISA: hur görs analysen? Kosta. Avkodning av resultaten

Analysmetoder med hög precision är en integrerad del av modern medicin och i synnerhet diagnostik. De diagnostiska metoder som finns tillgängliga i vår tid gör det möjligt att i rätt tid identifiera inte bara faktumet av närvaron utan också antalet parasiter i patientens kropp.

Nu erbjuds patienter som regel att endast genomgå ett test - enzymimmunanalys.

Tillämpning av ELISA-blodprov

Immunoanalys är en mycket specialiserad typ av analys som utförs i ett laboratorium. Analysen baseras på kroppens svar, vanligen kallad "antigen-antikropp".

Analysmetoden baserad på denna indikator ger en noggrannhet på 99%. Detta är den mest exakta metod som känns idag. I praktiken fanns det nästan inga fall då en sådan analys gav falska resultat..

Med den här metoden kan du identifiera:

  • ett betydande antal infektionssjukdomar orsakade av parasiter;
  • förekomsten av olika typer av tumörmarkörer;
  • i reproduktiv medicin - närvaron av proteiner, hormoner och peptider som är nödvändiga för att bedöma patientens fertilitet;

Testresultatens tillförlitlighet beror på flera faktorer:

  • en specifik typ av parasit;
  • antalet parasiter i kroppen;
  • deras reproduktionshastighet.

När tillämpas denna typ av analys??

Enzymimmunanalysen används i stor utsträckning vid diagnos av olika sjukdomar. Dess huvudvärde är att det låter dig exakt identifiera sjukdomar som är symptomfria.

Som ni vet är sådana sjukdomar ofta problematiska att upptäcka i ett tidigt skede och följaktligen börja behandlas i tid..

Vilka sjukdomar diagnostiseras med hjälp av enzymimmunanalys:

  • onkologiska sjukdomar;
  • sexuellt överförbara infektioner (HIV, klamydia, syfilis, ureaplasmos, herpes och andra sjukdomar);
  • tuberkulos, mässling, toxoplasmos, hepatit och så vidare;
  • sköldkörtelhormoner;
  • könshormoner;
  • olika autoimmuna störningar;
  • allergiska reaktioner och intolerans mot vissa livsmedel.

Vilka faktorer bygger ELISA på?

Denna procedur hjälper till att identifiera:

  • infektion i kroppen med bakterier och virus;
  • proteinbas;
  • helminthiska invasioner;
  • främmande kroppar.

Egentligen består ELISA-proceduren av två delar:

  1. immunsvar;
  2. enzymatisk reaktion.

Kärnan i principen "antigen-antikropp" är att det orsakande medlet för sjukdomen eller en främmande kropp, det vill säga antigenet, kommer in i kroppen gradvis tillsammans med infektionskällan. Denna process utlöser det så kallade immunsvaret, utformat för att skydda kroppen från främmande element..

Manifestationen av ett sådant skydd beror på själva antigenet och på symtomen på den sjukdom det orsakar. Detta schema kallas "antigen-antikropp".

För ökad diagnostisk tillförlitlighet utförs hela enzymimmunanalysförfarandet endast i laboratorier och medicinska centra. Olika antigener och antikroppar interagerar med blodprovet.

För att identifiera både typen och antalet parasiter i patientens kropp används immunglobulin i klass "A" och "E", vilket reagerar på parasitiska invasioner.

En sådan analys bör avslöja:

  • IgM;
  • IgA;
  • IgG;

Vad är immunsvaret och hur bestäms antigenigenkänning?

Immunsvaret visar biologiska bindningar i mikrobiella cellmolekyler, för vilka närvaron analysen utförs. Immunsvaret som sådant är bara en av komponenterna i ett omfattande ELISA-program, medan den andra komponenten är en enzymatisk reaktion.

Antigenigenkänning inträffar under kontakt av en cell i immunsystemet (immunocyt) med en främmande cell. Individuella egenskaper hos antigener tjänar som ett sätt att känna igen "vän eller fiende" för immunsystemet.

Vad är antikroppar?

Faktum är att antikroppen:

  • Det är bara en molekyl som ligger på ytan av en immuncyt..
  • Denna molekyl används för att känna igen främmande celler..

Överföringen av den mottagna informationen om antigenet sker på mobilnivå. Förbindelsen förstörs om cellen är immun, om inte, startar kroppen en naturlig försvarsreaktion.

Modern vetenskap känner till 5 klasser av antikroppar, annars kallade immunglobuliner eller proteinstrukturer.

Latinska bokstäver används för att beteckna antikroppar: A, D, E, G och M.

I analysresultaten ser dessa beteckningar ut så här:

  • IgA;
  • IgD;
  • IgE
  • IgG;
  • IgM.

Enzymimmunanalysförfarande

Först och främst är det nödvändigt att bereda speciella polystyrenplattor som innehåller 96 brunnar. Före analys behandlas väggarna i varje cell med ett adsorberande antigen.

Blodserum droppas i de behandlade cellerna. Homologa antikroppar och antigener reagerar med varandra för att bilda starka bindningar. Obundna kroppar tvättas ut. Sedan tillsätts immunglobulinantikroppar till brunnarna tillsammans med speciellt märkta enzymelement.

Reagenser är märkta för att underlätta identifiering av antikroppar i serumet som analyseras. Ett kromogent element som påskyndar reaktionen och tonar brunnarna tillsätts efter sköljning. Färgintensiteten jämfört med det studerade enzymet visar den ungefärliga andelen antigen i blodprovet.

Teknikern använder sedan den optiska vätskan för att:

  • mäta koncentrationen av antikroppar i brunnarna;
  • jämföra det erhållna resultatet med ett kontrollprov, det vill säga en standard;
  • beräkna koncentrationen av antikroppar med hjälp av en speciell skala.

För analys av helminthiska invasioner används en speciell version av testsystemet med en egen uppsättning indikatorer för normen och avvikelser från den.

Förberedelse för analys

Provtagning av blodserum för enzymimmunanalys utförs endast i ett laboratorium. De tar blod från en ven, tar bort element därifrån som kan påverka analysprocessen och noggrannheten i dess resultat. Ta en analys på morgonen på fastande mage.

Avkodning av resultaten av enzymimmunanalys

Antikropparnas kvalitet och kvantitet indikerar närvaron av främmande element i patientens kropp, inklusive patogener. Samma tecken indikerar att en inflammatorisk process har börjat i kroppen..

Ett exempel på avkodning av ELISA-resultat:

Steg av sjukdomenIgAIgMIgG
Primär (2 veckor efter infektion)+--
Primär (2,5-3 veckor från infektionsögonblicket)++-
Primär (3-4 veckor från infektionsögonblicket)+++
Förvärring av den kroniska fasen (två veckor från början av förvärringen)+-+
Kronisk+/--+
Tidigare (infektion läkt)--+
ÅterhämtningTitern minskade 2-4 gånger efter framgångsrik behandling-Titern minskade 4-8 gånger efter 1-1,5 månader efter framgångsrik behandling
Resultatet är negativt---

I sig gör den kvantitativa analysen som utförs med denna metod ännu inte det möjligt att korrekt diagnostisera sjukdomen, ordinera en behandlingsförlopp och bestämma dosen av läkemedel..

För- och nackdelar med ELISA

Alla testmetoder, även de mest avancerade och mycket exakta, tyvärr, förutom deras fördelar, har sina nackdelar..

Fördelar med enzymimmunanalys:

  • Specialisering av diagnosmetoden;
  • Ökad känslighet hos denna metod;
  • Tillämpning av den senaste tekniken.

Känsligheten hos diagnosmetoden är stor sannolikhet att hitta den önskade, även om dess koncentration i testmaterialet är extremt låg.

Teknikens specificitet betyder:

    en hög grad av tillförlitlighet, det vill säga det finns ingen risk att få ett falskt resultat. Om resultatet är positivt garanteras patienten att den exakta typen av parasit som han lider av finns.

  • påverkan på resultatet av den "mänskliga faktorn", det vill säga möjliga fel hos laboratorieassistenten, reduceras till noll, vilket också bidrar till en ökad noggrannhet.
  • Möjliga nackdelar med denna analysmetod:

    1. Det förutsätter bestämningen av sjukdomens natur, det vill säga det är omöjligt att intuitivt "gissa" rätt diagnos i detta fall;
    2. Höga analyskostnader.

    Jämförelse av duodenal och direkt enzymimmunanalys

    ELISA-proceduren använder direkt antikropparnas förmåga att hitta ett antigen genom att bilda bindningar med märkningar. Denna analysmetod anses vara industriell, väntetiden för resultatet är inte mer än en timme.

    En speciell underlagsmärkning visas efter jäsning. Antikroppsnivån motsvarar andelen antigener i det studerade biomaterialet.

    Det finns också en duodenal (annars - indirekt) forskningsmetod för parasitiska invasioner, som används i stor utsträckning, trots ELISAs höga noggrannhet..

    Duodenal (indirekt) enzymimmunanalys utförs i två steg:

    1. Först jämförs de märkta antikropparna med de önskade antigenerna;
    2. Applicera märkta antikroppar på omärkta antikroppar som hittades i föregående steg.

    Således uppnås dubbel kontroll av antigener och antikroppar, vilket ökar analysens tillförlitlighet.

    Med indirekt ELISA i laboratoriet fixeras antigenet på brunnens yta, det bildar bindningar med den omärkta delen av antikropparna.

    Fördelar med duodenal metod:

    • Dubbel kontroll av det studerade biomaterialet, vilket avsevärt ökar noggrannheten;
    • Ökad noggrannhet och specificitet för själva analysmetoden.

    Denna metod tar dock mycket tid och involverar ett antal ytterligare steg. Studiens noggrannhet är dock så hög att det motiverar denna nackdel. Av denna anledning rekommenderar de flesta läkare duodenalanalysmetoden..

    Vart ska man gå, hur länge man ska vänta och hur mycket man ska betala?

    Om du har alla nödvändiga verktyg och förbrukningsvaror kan du få resultatet inom två dagar efter leverans. Om laboratoriet har en expressanalystjänst kan provet bearbetas på bara 3-5 timmar.

    Var kan jag ta ELISA:

    • i en statlig klinik;
    • i privata kliniker.

    Priserna för enzymimmunanalys beror direkt på prisnivån i en viss klinik, i genomsnitt är priset minst 4000 rubel.

    Den information som erhållits från denna studie kan vara ett användbart bidrag till medicinsk vetenskap, men patienten bör komma ihåg att eftersom kostnaden för ett enzymimmunanalys är så hög, skulle det vara klokare att överlåta denna procedur till en pålitlig, tidstestad klinik..

    Tyvärr är statliga medicinska institutioner inte alltid utrustade med den senaste vetenskapen. De nödvändiga anordningarna för högkvalitativ provtagning av biomaterial och dess bearbetning i distriktskliniken kanske inte är tillgängliga.

    Så, hur är enzymimmunanalysen användbar för patienten:

    • låter dig upptäcka helminthisk invasion i ett tidigt skede;
    • som en konsekvens låter det dig börja behandlingen i rätt tid;
    • metodernas stabilitet gör det möjligt att utföra analysen med lika noggrannhet hos barn och vuxna.

    En enzymbunden immunosorbentanalys visar inte bara en kvalitativ, utan också en kvantitativ faktor, det vill säga, inte bara indikerar själva faktumet av närvaron av helminter i patientens kropp utan gör det också möjligt att uppskatta deras antal.